分子印迹固相萃取/高效液相色谱法分离和富集枳实中4种黄烷酮
发布时间：2021-12-12 08:38
采用沉淀聚合法以橙皮素为模板分子,2-乙烯基吡啶为功能单体,二甲基丙烯酸乙二醇酯为交联剂,合成了橙皮素分子印迹聚合物。利用紫外光谱法确定了最佳功能单体与配比,优化了合成条件。采用傅立叶变换红外光谱、扫描电子显微镜、静态吸附对聚合物进行表征。实验结果表明,分子印迹聚合物的吸附性能明显优于空白印迹聚合物,且此聚合物对柚皮苷、橙皮苷、柚皮素和橙皮素的相对选择系数分别为1.40,1.39,1.59和2.89,表明该分子印迹聚合物对4种黄烷酮有较好的选择性。将印迹聚合物作为固相萃取填料,对枳实提取液进行分离和富集,结果表明上述4种黄烷酮的提取率分别为72.6%,61.1%,95.4%和93.5%,分离富集效果良好,大大提高了枳实中4种黄烷酮的提取效率。
【文章来源】：分析测试学报. 2017,36(03)北大核心CSCD
【文章页数】：6 页
【部分图文】：
不同功能单体与橙皮素预聚合后的紫外吸收波长Fig.1UV－spectraofhesperetinwithdifferentmonomers
328分析测试学报第36卷图1不同功能单体与橙皮素预聚合后的紫外吸收波长Fig.1UV－spectraofhesperetinwithdifferentmonomersafterprepolymerization为功能单体。模板分子与功能单体的比例也会影响聚合物的吸附性能及其选择性，利用紫外分光光度计考察了橙皮素与2-VP在不同摩尔比下(1∶0，1∶2，1∶4，1∶6，1∶8)聚合后最大吸收峰的变化，实验结果表明，当橙皮素与2-VP的比例为1∶6时，紫外最大吸收峰发生了较大的红移，所以模板分子与2-VP的最佳比例为1∶6。图2MIP未洗脱(a)，NIP未洗脱(b)和橙皮素(c)的红外光谱Fig.2InfraredspectraofMIP(beforeeluting)(a)，andNIP(b)(beforeeluting)andhesperetin(c)表1致孔剂用量对聚合物的影响Table1TheeffectoftheamountofporogenonpolymersPolymerTemplate(mmol)Functionalmonomer(mmol)Crosslinker(mmol)Porogen(mL)Adsorptioncapacity(μmol/g)MIP41620309.78NIP4－620309.52MIP51620509.94NIP5－620507.68MIP61620809.27NIP6－620809.022.2.2交联剂用量的确定交联剂(EGDMA)的作用是固定模板分子和功能单体之间形成的复合体，使之在聚合物中具有固定的结合位点，从而实现聚合物对模板分子的专一选择性，所以EGDMA的用量至关重要。实验测定了橙皮素与EGDMA的摩尔比为1∶10(MIP1)，1∶20(MIP2)，1∶40(MIP3)时的吸附量，结果表明当橙皮素与EGDMA的比例为1∶20时，MIP2的吸附量最大，且与NIP2的吸附差异性较大，故选择两者的最佳比例为1∶20。2.2.3致孔剂用量的确定溶剂在聚合过程中通常作为分散介质和致孔剂，为聚合物的形成提供了合成环境［18］，实验选择极性较小的乙腈为致孔剂，考察了致孔剂用量对聚合物的影响(表1)。结果显示
相色谱法分离和富集枳实中4种黄烷酮3292.4静态吸附性能和Scatchard分析为研究聚合物的结合特性，测定了MIP和NIP吸附达平衡时的结合量Q，并对初始浓度(C0)作图，结果表明，MIP和NIP对橙皮素的结合量随浓度先增加后减少，在100mg/L时结合量达到最大，且在整个吸附过程中MIP对橙皮素的吸附量明显高于NIP，说明MIP的吸附能力主要来自于特异性结合位点，而NIP的吸附为非特异性结合。由Scatchard分析曲线(图4)可知，对MIP而言，Q/C对Q呈非线性关系，而图的两端呈线性，表明结合位点是非均一的，MIP有两种不同类型的图3MIP(A)和NIP(B)的扫描电镜图Fig.3ScanningelectronmicrogramsofMIP(A)andNIP(B)结合位点，即特异性结合位点和非特异性结合位点［21］，可计算出MIP所对应的Kd1=0.243μmol/mL，Qmax1=143.61μmol/g;Kd2=3.88μmol/mL，Qmax2=5.29μmol/g。而NIP线性关系较好，说明NIP只有一种吸附即非特异性吸附，其所对应的Kd=0.58μmol/mL，Qmax=30.86μmol/g。2.5选择性能评价实验根据平衡时的分配系数公式和吸附选择系数公式，可计算出MIP和NIP对柚皮苷、橙皮苷、柚皮素和橙皮素的选择性系数分别为1.40，1.39，1.59和2.89。由于该值越大，表明MIP及NIP对底物的选择吸附性越强，可知MIP对橙皮素的选择性大于其他3种物质，且MIP对4种结构类似图4MIP和NIP的Scatchard方程Fig.4ScatchardequationsofMIPandNIP物的分配系数均高于NIP。以上结果表明，MIP对4种黄烷酮类结构类似物具有一定的类特异选择性。2.6分子印迹固相萃取2.6.1分子印迹固相萃取条件的优化考察了4种黄烷酮标准溶液经过上样、淋洗和洗脱程序后在MISPE柱上的保留特性、柱去杂效果和目标物洗脱，从而筛选出最
【参考文献】：
期刊论文
[1]类特异性分子印迹固相萃取/高效液相色谱法分析马尿泡果实中4种托烷类生物碱[J]. 曾绍梅,焦必宁,刘广洋,王珊珊,赵风年,张超,王静,金茂俊,金芬,邵华,郑鹭飞,马兴斌,吴金措姆,苏学素,佘永新. 分析测试学报. 2016(04)
[2]中药枳实的研究进展[J]. 张霄潇,李正勇,马玉玲,马双成. 中国中药杂志. 2015(02)
[3]枳实总黄酮提取物中柚皮苷和新橙皮苷的大鼠药代动力学[J]. 马雪琴,李辰,袁林华,王世俊,柳晓泉. 中国药科大学学报. 2013(02)
[4]双模板大豆异黄酮类特异性分子印迹聚合物微球的制备及性能研究[J]. 李超,石波,张梦柯,韭泽悟,程永强. 食品工业科技. 2012(19)
[5]高速逆流色谱法分离纯化青皮中六种多甲氧基黄酮[J]. 于波,彭爱一,齐鑫,曲学伟,李慧,杨红. 天然产物研究与开发. 2010(03)
[6]高速逆流色谱分离制备广陈皮中多甲氧基黄酮类成分的研究[J]. 郑国栋,周芳,蒋林,杨得坡,杨雪,林乐维. 中草药. 2010(01)
[7]HPLC法测定不同规格酸橙枳实中新橙皮苷和柚皮苷的含量[J]. 黄爱华,曹骋,曾元儿,陈海丰. 药物分析杂志. 2009(09)
[8]橙皮素分子印迹聚合物的制备及其性能研究[J]. 邓茜珊,苏立强. 化工时刊. 2009(04)
[9]超声波提取柚皮中黄酮类化合物的工艺研究[J]. 蒋志国. 华南热带农业大学学报. 2006(03)
硕士论文
[1]分子印迹聚合物的制备及其吸附性能研究[D]. 李亚辉.河南师范大学 2012
[2]磺胺类药分子印迹聚合物的合成及其识别性能的研究[D]. 刘慧君.湖南大学 2005
本文编号：3536356
【文章来源】：分析测试学报. 2017,36(03)北大核心CSCD
【文章页数】：6 页
【部分图文】：
不同功能单体与橙皮素预聚合后的紫外吸收波长Fig.1UV－spectraofhesperetinwithdifferentmonomers
328分析测试学报第36卷图1不同功能单体与橙皮素预聚合后的紫外吸收波长Fig.1UV－spectraofhesperetinwithdifferentmonomersafterprepolymerization为功能单体。模板分子与功能单体的比例也会影响聚合物的吸附性能及其选择性，利用紫外分光光度计考察了橙皮素与2-VP在不同摩尔比下(1∶0，1∶2，1∶4，1∶6，1∶8)聚合后最大吸收峰的变化，实验结果表明，当橙皮素与2-VP的比例为1∶6时，紫外最大吸收峰发生了较大的红移，所以模板分子与2-VP的最佳比例为1∶6。图2MIP未洗脱(a)，NIP未洗脱(b)和橙皮素(c)的红外光谱Fig.2InfraredspectraofMIP(beforeeluting)(a)，andNIP(b)(beforeeluting)andhesperetin(c)表1致孔剂用量对聚合物的影响Table1TheeffectoftheamountofporogenonpolymersPolymerTemplate(mmol)Functionalmonomer(mmol)Crosslinker(mmol)Porogen(mL)Adsorptioncapacity(μmol/g)MIP41620309.78NIP4－620309.52MIP51620509.94NIP5－620507.68MIP61620809.27NIP6－620809.022.2.2交联剂用量的确定交联剂(EGDMA)的作用是固定模板分子和功能单体之间形成的复合体，使之在聚合物中具有固定的结合位点，从而实现聚合物对模板分子的专一选择性，所以EGDMA的用量至关重要。实验测定了橙皮素与EGDMA的摩尔比为1∶10(MIP1)，1∶20(MIP2)，1∶40(MIP3)时的吸附量，结果表明当橙皮素与EGDMA的比例为1∶20时，MIP2的吸附量最大，且与NIP2的吸附差异性较大，故选择两者的最佳比例为1∶20。2.2.3致孔剂用量的确定溶剂在聚合过程中通常作为分散介质和致孔剂，为聚合物的形成提供了合成环境［18］，实验选择极性较小的乙腈为致孔剂，考察了致孔剂用量对聚合物的影响(表1)。结果显示
相色谱法分离和富集枳实中4种黄烷酮3292.4静态吸附性能和Scatchard分析为研究聚合物的结合特性，测定了MIP和NIP吸附达平衡时的结合量Q，并对初始浓度(C0)作图，结果表明，MIP和NIP对橙皮素的结合量随浓度先增加后减少，在100mg/L时结合量达到最大，且在整个吸附过程中MIP对橙皮素的吸附量明显高于NIP，说明MIP的吸附能力主要来自于特异性结合位点，而NIP的吸附为非特异性结合。由Scatchard分析曲线(图4)可知，对MIP而言，Q/C对Q呈非线性关系，而图的两端呈线性，表明结合位点是非均一的，MIP有两种不同类型的图3MIP(A)和NIP(B)的扫描电镜图Fig.3ScanningelectronmicrogramsofMIP(A)andNIP(B)结合位点，即特异性结合位点和非特异性结合位点［21］，可计算出MIP所对应的Kd1=0.243μmol/mL，Qmax1=143.61μmol/g;Kd2=3.88μmol/mL，Qmax2=5.29μmol/g。而NIP线性关系较好，说明NIP只有一种吸附即非特异性吸附，其所对应的Kd=0.58μmol/mL，Qmax=30.86μmol/g。2.5选择性能评价实验根据平衡时的分配系数公式和吸附选择系数公式，可计算出MIP和NIP对柚皮苷、橙皮苷、柚皮素和橙皮素的选择性系数分别为1.40，1.39，1.59和2.89。由于该值越大，表明MIP及NIP对底物的选择吸附性越强，可知MIP对橙皮素的选择性大于其他3种物质，且MIP对4种结构类似图4MIP和NIP的Scatchard方程Fig.4ScatchardequationsofMIPandNIP物的分配系数均高于NIP。以上结果表明，MIP对4种黄烷酮类结构类似物具有一定的类特异选择性。2.6分子印迹固相萃取2.6.1分子印迹固相萃取条件的优化考察了4种黄烷酮标准溶液经过上样、淋洗和洗脱程序后在MISPE柱上的保留特性、柱去杂效果和目标物洗脱，从而筛选出最
【参考文献】：
期刊论文
[1]类特异性分子印迹固相萃取/高效液相色谱法分析马尿泡果实中4种托烷类生物碱[J]. 曾绍梅,焦必宁,刘广洋,王珊珊,赵风年,张超,王静,金茂俊,金芬,邵华,郑鹭飞,马兴斌,吴金措姆,苏学素,佘永新. 分析测试学报. 2016(04)
[2]中药枳实的研究进展[J]. 张霄潇,李正勇,马玉玲,马双成. 中国中药杂志. 2015(02)
[3]枳实总黄酮提取物中柚皮苷和新橙皮苷的大鼠药代动力学[J]. 马雪琴,李辰,袁林华,王世俊,柳晓泉. 中国药科大学学报. 2013(02)
[4]双模板大豆异黄酮类特异性分子印迹聚合物微球的制备及性能研究[J]. 李超,石波,张梦柯,韭泽悟,程永强. 食品工业科技. 2012(19)
[5]高速逆流色谱法分离纯化青皮中六种多甲氧基黄酮[J]. 于波,彭爱一,齐鑫,曲学伟,李慧,杨红. 天然产物研究与开发. 2010(03)
[6]高速逆流色谱分离制备广陈皮中多甲氧基黄酮类成分的研究[J]. 郑国栋,周芳,蒋林,杨得坡,杨雪,林乐维. 中草药. 2010(01)
[7]HPLC法测定不同规格酸橙枳实中新橙皮苷和柚皮苷的含量[J]. 黄爱华,曹骋,曾元儿,陈海丰. 药物分析杂志. 2009(09)
[8]橙皮素分子印迹聚合物的制备及其性能研究[J]. 邓茜珊,苏立强. 化工时刊. 2009(04)
[9]超声波提取柚皮中黄酮类化合物的工艺研究[J]. 蒋志国. 华南热带农业大学学报. 2006(03)
硕士论文
[1]分子印迹聚合物的制备及其吸附性能研究[D]. 李亚辉.河南师范大学 2012
[2]磺胺类药分子印迹聚合物的合成及其识别性能的研究[D]. 刘慧君.湖南大学 2005
本文编号：3536356
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教材专著
