基于液质联用法筛选骨碎补中的天然乙酰胆碱酯酶抑制剂

发布时间：2022-02-16 15:57

　　乙酰胆碱酯酶抑制剂（Acetylcholinesterase inhibitors,AChEIs）是目前世界上治疗阿尔兹海默症（Alzheimer’s Disease,AD）的有效药物。在天然药物中开发寻找适合AD患者能够长久服用、药物毒副作用小等优势的AChEIs受到了科研工作者的广泛关注。骨碎补（Drynariae Rhizome）广泛分布于我国辽宁、山东、江苏等地,作为一种天然药用植物在临床上经常被用作治疗认知功能障碍。基于分光光度计的Ellman’s法是筛选潜在AChEIs最经典的方法,多应用于体外乙酰胆碱酯酶（Acetylcholinesterase,AChE）抑制活性的测定。但是,天然药用植物的成分复杂具有不确定性,分光光度法容易产生假阳性或假阴性结果。本课题以（Ultra Performance Liquid Chromatography tandem Mass Spectrometry,UPLC-MS/MS）为基础,建立了体内和体外AChE催化碘化乙酰胆碱（Iodized Acetylcholine,ACh-I）转化为碘化胆碱（Iodized Choline,Ch-I）... 

【文章来源】：哈尔滨师范大学黑龙江省

【文章页数】：79 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第1章 绪论
    1.1 前言
    1.2 阿尔兹海默症研究现状
        1.2.1 阿尔茨海默病
        1.2.2 AD的发病机制
        1.2.3 乙酰胆碱酯酶抑制剂
    1.3 乙酰胆碱酯酶抑制剂筛选方法
        1.3.1 Ellman's方法
        1.3.2 薄层色谱生物自显影法
        1.3.3 荧光显色法
        1.3.4 固定化酶法
        1.3.5 液相色谱、质谱以及联用技术
    1.4 中医药治疗AD的优势
        1.4.1 针灸治疗AD
        1.4.2 中药治疗AD
        1.4.3 针药治疗AD
        1.4.4 改善记忆功能的天然化合物
    1.5 骨碎补的研究现状
        1.5.1 骨碎补的临床应用
        1.5.2 骨碎补的化学成分研究
        1.5.3 骨碎补的药理作用
    1.6 立题依据
第2章 基于液质联用的AChE抑制活性体外筛选方法的构建
    2.1 前言
    2.2 实验仪器和材料
        2.2.1 仪器
        2.2.2 材料
        2.2.3 溶液的配制
    2.3 实验原理
    2.4 实验方法与结果
        2.4.1 反应参数优化
        2.4.2 仪器分析方法
        2.4.3 方法学验证
        2.4.4 阳性对照药抑制率检测
    2.5 讨论
        2.5.1 反应条件优化
        2.5.2 色谱条件优化
        2.5.3 质谱条件优化
    2.6 小结
第3章 对骨碎补中天然乙酰胆碱酯酶抑制剂的导向分离
    3.1 前言
    3.2 实验仪器和材料
        3.2.1 仪器
        3.2.2 材料
        3.2.3 药材及来源
    3.3 实验结果与方法
        3.3.1 骨碎补分离流程
        3.3.2 骨碎补各提取部位AChE抑制活性体外筛选
        3.3.3 骨碎补正丁醇部位分离流程
        3.3.4 得到的八种化合物AChE抑制活性体外筛选
    3.4 讨论
    3.5 小结
第4章 基于液质联用法的AChE体内活性检测方法的构建
    4.1 前言
    4.2 实验仪器和材料
        4.2.1 仪器
        4.2.2 材料
        4.2.3 实验动物
        4.2.4 溶液的配制
    4.3 实验原理
    4.4 实验结果与方法
        4.4.1 生物样品的制备
        4.4.2 反应参数优化
        4.4.3 仪器分析方法
        4.4.4 方法学验证
        4.4.5 大鼠血浆、脑组织中AChE活性检测
    4.5 讨论
        4.5.1 抑制剂的选择
        4.5.2 内标物的选择
        4.5.3 生物样本的选择
        4.5.4 生物样品制备的优化
        4.5.5 反应条件优化
    4.6 小结
第5章 骨碎补总黄酮对老年雌性大鼠血液及脑组织中AChE酶活性的影响
    5.1 前言
    5.2 实验仪器和材料
        5.2.1 仪器
        5.2.2 材料
    5.3 实验方法与结果
        5.3.1 骨碎补正丁醇提取部位制备
        5.3.2 溶液的配制
        5.3.3 实验动物及分组
        5.3.4 骨碎补总黄酮对血浆、脑组织AChE酶活力的影响
        5.3.5 血浆、脑组织AChE酶活力计算
    5.4 讨论
    5.5 小结
结论与展望
参考文献
攻读硕士学位期间所发表的学术论文
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]240例多奈哌齐致不良反应统计分析[J]. 吕小琴,胡婷霞,刘赛月,马敏康.  中国临床药学杂志. 2018(05)
[2]杨树花化学成分的分离鉴定Ⅱ[J]. 侯勇,厉博文,张广杰,李敏,缪潇瑶,崔慧敏,夏梓铭,田瑛,刘士军,陈立,李彬,董俊兴.  中国实验方剂学杂志. 2018(23)
[3]骨碎补化学成分及其对PC12细胞的保护作用研究[J]. 王凤娇,王婷婷,徐铭玥,徐占玲,顾婷,张宁,耿放.  中国药学杂志. 2018(16)
[4]骨碎补药理作用的研究进展[J]. 檀龙颜,马洪娜.  中国民族民间医药. 2017(11)
[5]骨碎补总黄酮的富集工艺及其对Aβ25-35诱导PC12损伤细胞保护作用研究[J]. 刘婷婷,顾婷,葛雅南,耿放.  黑龙江科技信息. 2017(03)
[6]骨碎补化学成分研究[J]. 隋洪飞,尹世强,邹爱英.  中草药. 2015(20)
[7]骨碎补化学成分分离鉴定[J]. 隋洪飞.  内蒙古中医药. 2015(05)
[8]骨碎补化学成分和药理作用研究进展[J]. 钱茜.  中国生化药物杂志. 2015(03)
[9]骨碎补总黄酮对大肠杆菌脂多糖诱导的急性肾衰竭大鼠ICAM-1基因表达的影响[J]. 罗颖,蒋文功,崔淑兰.  河北医学. 2013(01)
[10]骨碎补中的化学成分及药理作用研究进展[J]. 彭双,韩立峰,王涛,潘桂湘.  天津中医药大学学报. 2012(02)



本文编号：3628245