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磁性高分子微球的制备及应用研究

发布时间:2017-05-13 22:06

  本文关键词:磁性高分子微球的制备及应用研究,,由笔耕文化传播整理发布。


【摘要】:随着生物医学和生物工程相关领域研究的发展,功能性聚合物微球的制备越来越受到人们的关注。如何可控的制备出理想的磁性高分子微球以及将这些微球应用于免疫检测和固定化酶等方面是磁性高分子复合微球一个重要研究的方向。首先针对目前磁性高分子微球普遍存在单分散性差、磁响应性弱的不足之处,本文采用可控原子转移自由基聚合反应(ATRP)制备出粒径分布窄、磁含量高且表面带有活性功能基团的磁性高分子微球。然后研究其在HCG磁酶联化学发光检测中的应用性能。具体的研究内容如下: 一、通过化学共沉淀法制备得到粒径在几个纳米的磁性粒子,然后将对氯甲基苯甲酸(引发剂)枝接到磁性粒子的表面,通过激光粒度仪,透射电镜和红外检测器的检测表征,证实了磁性粒子的表面枝接上了对氯甲基苯甲酸。 二、以CuCl-BPY体系做为催化体系,加入单体丙烯酸和苯乙烯,进行原子转移自由基聚合(ATRP),制备表面富含羧基的磁性高分子复合微球,并详细讨论了影响聚合反应的因素如反应时间、温度、转速等,找到了较优的实验条件。通过红外,化学滴定等方法表征其表面的官能团,发现其表面羧基含量最高可达0.65mmol/g。扫面电镜、透射电镜的结果表明磁性高分子微球的粒径集中在50nm左右,磁滞回线和相关的磁性研究表明了制备得到的磁性高分子微球具有良好的磁响应性和超顺磁性。 三、将制备得到的磁性高分子微球用于HCG的检测中,期间考察了两种不同酶标方法的酶标效率、ALP-AMPPD体系发光强度与ALP的浓度关系、最佳反应时间、检测时间以及磁性高分子微球的浓度对发光强度的影响,得到了最优的检测条件,并对检测的重现性进行了考察,发现相对标准偏差为5.46%,重现性良好。实验结果证实检测时间只需要2h,线性范围为5-300U/L,检测限在2.55U/L,线性相关性系数为0.98733。
【关键词】:磁性高分子微球 ATRP HCG 化学发光
【学位授予单位】:杭州师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2013
【分类号】:O631
【目录】:
  • 摘要5-6
  • Abstract6-10
  • 第一章 文献综述及研究现状10-19
  • 1.1 磁性高分子微球的制备10-14
  • 1.1.1 包埋法11-12
  • 1.1.2 乳液聚合法12-13
  • 1.1.3 悬浮聚合法13
  • 1.1.4 ATRP法制备磁性高分子微球13-14
  • 1.1.5 生物学方法制备磁性高分子微球14
  • 1.2 磁性高分子微球的应用研究现状14-17
  • 1.2.1 靶向药物14-15
  • 1.2.2 生物分离15-16
  • 1.2.3 肿瘤热疗16
  • 1.2.4 免疫检测16-17
  • 1.3 本论文的选题思路和实验安排17-19
  • 1.3.1 选题思路17-18
  • 1.3.2 实验安排18-19
  • 第二章 纳米磁性粒子的制备及表面修饰19-31
  • 2.1 反应机理19-20
  • 2.2 实验部分20-21
  • 2.2.1 实验药品和仪器20
  • 2.2.2 实验步骤20-21
  • 2.3 分析检测21
  • 2.3.1 检测项目21
  • 2.4 结果与讨论21-31
  • 2.4.1 反应温度对磁性粒子的粒径的影响21-24
  • 2.4.2 投入的原料浓度对反应粒径的影响24-26
  • 2.4.3 所得的磁性粒子的表征26-31
  • 第三章 功能化磁性高分子微球的制备及表征31-41
  • 3.1 实验原理31-32
  • 3.2 实验部分32-34
  • 3.2.1 实验药品和仪器32-33
  • 3.2.2 实验步骤33-34
  • 3.3 结果与讨论34-41
  • 3.3.1 反应时间对羧基含量的影响34-35
  • 3.3.2 反应原料的投入量比对羧基含量的影响35
  • 3.3.3 搅拌转速对羧基含量的影响35-36
  • 3.3.4 温度对羧基含量的影响36-37
  • 3.3.5 制备得到的磁性高分子微球的表征37-41
  • 第四章 磁性高分子复合微球在免疫分析中的应用研究41-52
  • 4.1 原理及药品仪器41-43
  • 4.1.1 发光原理41-42
  • 4.1.2 本章中用到的试剂42-43
  • 4.1.3 仪器和器材43
  • 4.2 实验步骤43-45
  • 4.2.1 用到的缓冲液43-44
  • 4.2.2 酶标记抗体的制备44
  • 4.2.3 抗体包被磁性高分子微球44
  • 4.2.4 双抗体夹心法检测HCG44-45
  • 4.3 实验结果45-52
  • 4.3.1 ALP的活性检测45
  • 4.3.2 ALP低浓度时与发光强度的线性关系45-46
  • 4.3.3 两种酶标记抗体方法的比较46-47
  • 4.3.4 磁性高分子微球加入量对发光的遮蔽作用47
  • 4.3.5 磁微球浓度改变的影响47-48
  • 4.3.6 关于检测时间的选择48-49
  • 4.3.7 关于酶标抗体浓度的选择49-50
  • 4.3.8 关于反应时间的选择50
  • 4.3.9 关于检测重现性的验证50-51
  • 4.3.10 关于HCG浓度的线性关系51-52
  • 第五章 结论及后续工作52-53
  • 参考文献53-58
  • 致谢58-59
  • 攻读硕士学位期间的研究成果59

【参考文献】

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本文编号:363726

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