呋喃脂肪酸的质谱检测方法建立及其对ob/ob小鼠生理功能的影响研究
发布时间：2023-04-02 05:45
呋喃脂肪酸是一类含有呋喃五元杂环的脂肪酸,主要存在于一些绿色植物、海藻和鱼中。近年来的研究表明,呋喃脂肪酸的一个代谢产物3-羧基-4-甲基-5-丙基-2-呋喃丙酸(3-carboxy-4-methyl-5-propyl-2-furanpropanoic acid,CMPF)的含量在妊娠期糖尿病患者、糖耐量受损患者和二型糖尿病患者体内显著上升,并且可以导致胰岛素分泌受损。然而,呋喃脂肪酸至CMPF的代谢通路尚不清晰,对糖尿病病人生理功能的影响也尚无定论。据报道,呋喃脂肪酸在食品和生物样本中的存在含量极低,普通的检测方法难以实现准确定性和精准定量。因此,建立灵敏的质谱检测方法,实现食品和生物样本中呋喃脂肪酸的精准定量,是揭示呋喃脂肪酸代谢的重要手段和前提。此外,研究呋喃脂肪酸对糖尿病病人生理功能的影响,有助于阐释呋喃脂肪酸的生物学意义。本研究利用现代质谱技术中常用的GC-TQ/MS、UPLC/ESI-MS/MS和多维质谱鸟枪法,研究了食用油脂、人体血浆以及食品用天然乳胶材料中呋喃脂肪酸的种类及含量。进而,探索了呋喃脂肪酸对ob/ob小鼠生理功能的影响,并对其潜在的代谢产物进行了定量分析。主...
【文章页数】：154 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略词表
第一章 绪论
1.1 呋喃脂肪酸概述
1.1.1 呋喃脂肪酸的来源
1.1.2 呋喃脂肪酸的生物合成
1.1.3 呋喃脂肪酸的功能
1.1.4 呋喃脂肪酸的代谢
1.2 3-羧基-4-甲基-5-丙基-2-呋喃丙酸(CMPF)概述
1.2.1 CMPF与糖尿病之间的关系
1.2.2 CMPF与肾病之间的关系
1.2.3 CMPF与健康的关系
1.3 呋喃脂肪酸的检测方法
1.3.1 呋喃脂肪酸的富集
1.3.2 呋喃脂肪酸的检测
1.4 本课题研究背景、意义以及主要研究内容
1.4.1 研究背景及意义
1.4.2 研究内容
第二章 呋喃脂肪酸的GC-TQ/MS分析方法的建立及应用
2.1 引言
2.2 材料与仪器
2.2.1 材料及试剂
2.2.2 实验仪器
2.3 实验方法
2.3.1 呋喃脂肪酸的不同衍生化方法
2.3.2 GC-MS检测衍生化产物的实验条件
2.3.3 MRM模式下的质谱参数优化及离子对设置
2.3.4 常见油脂中呋喃脂肪酸的定性及定量
2.4 结果与讨论
2.4.1 GC-MS的全扫描监测模式
2.4.2 呋喃脂肪酸在EI离子源中离子化时的裂解机制
2.4.3 全扫描监测模式下的检测限和定量限
2.4.4 利用SIM监测模式探索呋喃脂肪酸同系物
2.4.5 MRM监测模式下呋喃脂肪酸的监测离子对
2.4.6 全扫描、SIM和 MRM监测模式的比较
2.4.7 精密度和准确度
2.4.8 几种呋喃脂肪酸检测方法的比较
2.4.9 常见食用油脂中的呋喃脂肪酸的定量
2.5 本章小结
第三章 UPLC/ESI-MS/MS在呋喃脂肪酸定性及定量中的应用
3.1 引言
3.2 材料与仪器
3.2.1 材料及试剂
3.2.2 实验仪器
3.3 实验方法
3.3.1 衍生化试剂的合成
3.3.2 标准品与质控样品的配制
3.3.3 呋喃脂肪酸的衍生
3.3.4 基质标曲的建立
3.3.5 呋喃脂肪酸衍生物的色谱出峰顺序
3.3.6 方法开发及验证
3.3.7 人体血浆样品前处理方法
3.3.8 呋喃脂肪酸的检测方法优化
3.4 结果与讨论
3.4.1 非衍生化方法
3.4.2 衍生化方法
3.4.3 呋喃脂肪酸的色谱性质
3.4.4 方法验证
3.4.5 方法选择性
3.4.6 线性范围
3.4.7 人体血浆中呋喃脂肪酸的靶向定量
3.4.8 人体血浆中呋喃脂肪酸的非靶向定量
3.5 本章小结
第四章 多维质谱鸟枪法在呋喃脂肪酸的定性及定量中的应用
4.1 引言
4.2 材料与仪器
4.2.1 材料及试剂
4.2.2 实验仪器
4.3 实验方法
4.3.1 脂质组的萃取
4.3.2 多维质谱鸟枪法测定脂质组
4.3.3 脂质的萃取及甲酯化
4.3.4 GC-MS测定脂肪酸组成
4.3.5 UPLC/ESI-HRMS/MS测定呋喃脂肪酸
4.4 结果与讨论
4.4.1 MDMS-SL分析脂质组
4.4.2 GC-MS分析脂肪酸组成
4.4.3 UPLC/ESI-HRMS/MS分析脂肪酸
4.5 本章小结
第五章 呋喃脂肪酸在ob/ob小鼠体内的代谢及其功能评价
5.1 引言
5.2 材料与仪器
5.2.1 材料及试剂
5.2.2 实验仪器
5.3 实验方法
5.3.1 实验动物模型
5.3.2 呋喃脂肪酸-橄榄油混合物的配制
5.3.3 实验动物的处理
5.3.4 血浆和血清的制备
5.3.5 组织石蜡包埋切片实验步骤
5.3.6 H&E染色实验步骤
5.3.7 血浆中CMPF及其类似物的提取
5.3.8 血浆中CMPF及其类似物的检测
5.4 结果与讨论
5.4.1 小鼠体重及各项生理指标的变化
5.4.2 血浆CMPF及其类似物的含量
5.4.3 肝脏和肾脏H&E染色结果
5.5 本章小结
结论与展望
1.主要研究结论
2.主要创新点
3.未来工作展望
参考文献
附录
攻读博士学位期间取得的研究成果
致谢
附件
本文编号：3778663
【文章页数】：154 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略词表
第一章 绪论
1.1 呋喃脂肪酸概述
1.1.1 呋喃脂肪酸的来源
1.1.2 呋喃脂肪酸的生物合成
1.1.3 呋喃脂肪酸的功能
1.1.4 呋喃脂肪酸的代谢
1.2 3-羧基-4-甲基-5-丙基-2-呋喃丙酸(CMPF)概述
1.2.1 CMPF与糖尿病之间的关系
1.2.2 CMPF与肾病之间的关系
1.2.3 CMPF与健康的关系
1.3 呋喃脂肪酸的检测方法
1.3.1 呋喃脂肪酸的富集
1.3.2 呋喃脂肪酸的检测
1.4 本课题研究背景、意义以及主要研究内容
1.4.1 研究背景及意义
1.4.2 研究内容
第二章 呋喃脂肪酸的GC-TQ/MS分析方法的建立及应用
2.1 引言
2.2 材料与仪器
2.2.1 材料及试剂
2.2.2 实验仪器
2.3 实验方法
2.3.1 呋喃脂肪酸的不同衍生化方法
2.3.2 GC-MS检测衍生化产物的实验条件
2.3.3 MRM模式下的质谱参数优化及离子对设置
2.3.4 常见油脂中呋喃脂肪酸的定性及定量
2.4 结果与讨论
2.4.1 GC-MS的全扫描监测模式
2.4.2 呋喃脂肪酸在EI离子源中离子化时的裂解机制
2.4.3 全扫描监测模式下的检测限和定量限
2.4.4 利用SIM监测模式探索呋喃脂肪酸同系物
2.4.5 MRM监测模式下呋喃脂肪酸的监测离子对
2.4.6 全扫描、SIM和 MRM监测模式的比较
2.4.7 精密度和准确度
2.4.8 几种呋喃脂肪酸检测方法的比较
2.4.9 常见食用油脂中的呋喃脂肪酸的定量
2.5 本章小结
第三章 UPLC/ESI-MS/MS在呋喃脂肪酸定性及定量中的应用
3.1 引言
3.2 材料与仪器
3.2.1 材料及试剂
3.2.2 实验仪器
3.3 实验方法
3.3.1 衍生化试剂的合成
3.3.2 标准品与质控样品的配制
3.3.3 呋喃脂肪酸的衍生
3.3.4 基质标曲的建立
3.3.5 呋喃脂肪酸衍生物的色谱出峰顺序
3.3.6 方法开发及验证
3.3.7 人体血浆样品前处理方法
3.3.8 呋喃脂肪酸的检测方法优化
3.4 结果与讨论
3.4.1 非衍生化方法
3.4.2 衍生化方法
3.4.3 呋喃脂肪酸的色谱性质
3.4.4 方法验证
3.4.5 方法选择性
3.4.6 线性范围
3.4.7 人体血浆中呋喃脂肪酸的靶向定量
3.4.8 人体血浆中呋喃脂肪酸的非靶向定量
3.5 本章小结
第四章 多维质谱鸟枪法在呋喃脂肪酸的定性及定量中的应用
4.1 引言
4.2 材料与仪器
4.2.1 材料及试剂
4.2.2 实验仪器
4.3 实验方法
4.3.1 脂质组的萃取
4.3.2 多维质谱鸟枪法测定脂质组
4.3.3 脂质的萃取及甲酯化
4.3.4 GC-MS测定脂肪酸组成
4.3.5 UPLC/ESI-HRMS/MS测定呋喃脂肪酸
4.4 结果与讨论
4.4.1 MDMS-SL分析脂质组
4.4.2 GC-MS分析脂肪酸组成
4.4.3 UPLC/ESI-HRMS/MS分析脂肪酸
4.5 本章小结
第五章 呋喃脂肪酸在ob/ob小鼠体内的代谢及其功能评价
5.1 引言
5.2 材料与仪器
5.2.1 材料及试剂
5.2.2 实验仪器
5.3 实验方法
5.3.1 实验动物模型
5.3.2 呋喃脂肪酸-橄榄油混合物的配制
5.3.3 实验动物的处理
5.3.4 血浆和血清的制备
5.3.5 组织石蜡包埋切片实验步骤
5.3.6 H&E染色实验步骤
5.3.7 血浆中CMPF及其类似物的提取
5.3.8 血浆中CMPF及其类似物的检测
5.4 结果与讨论
5.4.1 小鼠体重及各项生理指标的变化
5.4.2 血浆CMPF及其类似物的含量
5.4.3 肝脏和肾脏H&E染色结果
5.5 本章小结
结论与展望
1.主要研究结论
2.主要创新点
3.未来工作展望
参考文献
附录
攻读博士学位期间取得的研究成果
致谢
附件
本文编号：3778663
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