富含二硫键多肽/蛋白质的化学合成新方法及其结构研究

发布时间：2024-03-16 15:06

　　近年来,多肽/蛋白质类药物由于具有靶向性强、药效高、毒副作用低,在体内易于代谢等特点受到了制药领域的广泛关注。其中毒素多肽/蛋白是一类富含二硫键的特殊功能多肽,主要是通过与细胞的特定受体蛋白(如通道蛋白)相互结合进而发挥作用。这些受体蛋白通常都是重要的离子通道(膜蛋白),与细胞的增值分化乃至人类各种疾病密切相关。由于毒素蛋白是自然界长期进化的产物,它们与特定受体结合的特异性和效率远超过人工通过高通量筛选得到的小分子化合物。基于此,毒素多肽/蛋白因具有良好的生物活性、极高的特异性而成为当前多肽药物开发的研究热点。然而,由于毒素多肽/蛋白具有的特殊结构,使用传统的基因重组表达方法难以大量获得具有正确结构、功能的该类蛋白质。近期兴起的蛋白质化学合成法则弥补了传统方法中的这些问题,甚至在产量和效率上也都有明显优势,蛋白质的化学合成目前已被认为是获得多肽和蛋白质的一种高效、有力的手段。本文作者运用多肽酰肼连接技术结合的多肽/蛋白质固相合成策略,高效的合成了一系列富含二硫键的毒素多肽(人源β防御素-4,μ-芋螺毒素SⅢA,以及海葵毒素肽APET×2),并使用优化的条件成功将其复性,获得了具有正确空...

【文章页数】：75 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１．１固相多肤合成示意图??Ｆｉ１．１?Ｓｃｈｅｍｅ?ｏｆｓｏｌｉｄ－ｈａｓｅｅｔｉｄｅ?ｓｎｔｈｅｓｉｓ??

脱除Ｆｍｏｃ保护基的试剂，最后切割树脂用的是相对安全的兰氣己酸??（Ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃａｃｉｄ，?ＴＦＡ）?口］。所ＷＦｍｏｃ法是当今被应用最多的蛋白质化学合??成方法。这两种固相合成方法的过程示意图如图１．１；??Ｂｏｃ－ＳＰＰＳ?Ａ２??Ａ?Ａ?Ｏ?１．重复操作?....

图１．２硫醋胺解反应示意图??

可＾式用相同的催化剂对硫醋进行胺解反应Ｗ。同样的，Ａｉｍｏｔｏ试图把新的胺解反??应应用到多肤片段链接反应中，由于硫醋的稳定性比硫代幾酸化好很多，所他成??功地合成了膜蛋白酶抑制剂（ＢＰＴＩ）等重要蛋白。硫醋胺解反应如图１．２所示：??巧。?帮。??ｐｅｐｔｉｄｅ?１?Ｋ＾ＳＲ?....

图１．３疏基捕获链接的反应示意图??Ｆｉｇ?１．３?Ｓｃｈｅｍｅ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｒｅａｃｔｉｏ打?ｏｆ?ｓｕｌｐｈｕｒ?ｃａｐｔｕｒｅ??

图１．３疏基捕获链接的反应示意图??Ｆｉｇ?１．３?Ｓｃｈｅｍｅ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｒｅａｃｔｉｏ打?ｏｆ?ｓｕｌｐｈｕｒ?ｃａｐｔｕｒｅ??１９９４年，Ｔａｍ组也发展了一种通过醜基转移形成化键的连接方法。如图１．４??所示，该方法是用一段化片段的Ｃ末端酵基捕获另一条肤片段Ｎ末端的氨....

图１．４亚胺捕获连接的反应示意图??Ｆｉｇ?１．４?Ｓｃｈｅｍｅ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｒｅａｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ｉｍｉ打ｅ?ｃａｐｔｕｒｅ??

?Ｈ?０?广，?支??ＨｓＮ—ｊ?Ｐｅｐｔｉｄｅ?ｌ?｝＾Ｎ了义ＰｅｐｔＷｅ?ａ＂！＾乂ＯＨ????Ｐｅｐ＂ｄ６?＂ｉ，丰丫Ｎ了又ｎ／?—口邹巧＾户＾〇Ｈ??图１．３疏基捕获链接的反应示意图??Ｆｉｇ?１．３?Ｓｃｈｅｍｅ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｒｅａｃｔｉｏ打?ｏｆ?ｓｕｌｐｈｕｒ?ｃ....

本文编号：3929711