刺激响应性高分子材料用于蛋白药物递送控释的研究
发布时间：2024-06-07 23:32
蛋白质疗法由于其高效、高特异性和低毒副作用等优点,在多种疾病的治疗方面具有广阔的应用前景,如抗癌类抗体贝伐单抗、利妥昔单抗等,小分子蛋白端粒酶B、细胞色素C、RNA酶A等,治疗糖尿病类药物胰岛素等,治疗自身免疫疾病的IL-6单抗、IL-17单抗、CD20单抗等。然而,由于蛋白类药物易变性失活、膜渗透能力差等特点,蛋白药物的临床转化受到极大地限制。本论文以高分子载体为基础,利用肿瘤生理微环境的特点,设计了纳米凝胶与植入支架的高分子载体用于维持蛋白药物在递送过程的生理活性并实现蛋白药物在靶向部位的可控释放。具体的研究内容和主要结论如下:(1)葡萄糖与pH双敏感型纳米凝胶用于蛋白药物的细胞内递送。苯硼酸与顺式二醇可以在生理环境下形成硼酯键,而形成的硼酯键可以在高葡聚糖浓度或者酸性环境下发生断裂。我们利用这个反应,以葡聚糖和聚(L-谷氨酸)-g-甲氧基聚乙二醇/氨基苯硼酸(PLG-g-mPEG/PBA)为基础,设计了由苯硼酸和顺式二醇交联形成的pH和葡萄糖双响应型生物可降解纳米凝胶用于蛋白药物的递送。交联网格使α-淀粉酶和透明质酸酶的载药效率分别达到55.6%和29.1%。蛋白药物的体外释放曲...
【文章页数】：127 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第1章 绪论
1.1 蛋白药物在肿瘤治疗方面的应用
1.1.1 肿瘤的治疗
1.1.2 肿瘤微环境的特征
1.2 蛋白药物的体内递送方式-PEG化
1.3 蛋白药物递送的载体
1.3.1 脂质体类
1.3.2 纳米凝胶
1.3.3 高分子纳米粒子
1.3.4 无机纳米粒子
1.3.5 微球
1.3.6 水凝胶
1.4 敏感型高分子载体递送体系
1.4.1 pH敏感型高分子载体
1.4.2 温度敏感型高分子载体
1.4.3 酶敏感型高分子载体
1.4.4 葡萄糖敏感型高分子载体
1.5 凝胶与纳米凝胶的交联机制
1.5.1 物理交联
1.5.2 化学交联
1.6 本论文的选题目的以及主要研究内容
第2章 葡萄糖与pH双响应型纳米凝胶用于蛋白药物的高效递送
2.1 前言
2.2 实验材料和实验方法
2.2.1 实验材料
2.2.2 仪器与表征
2.2.3 PLG-g-mPEG/PBA的制备
2.2.4 空白纳米凝胶与负载蛋白的纳米凝胶的制备
2.2.5 体外释放与释放后蛋白药物的圆二色谱
2.2.6 纳米凝胶的细胞内吞
2.2.7 纳米凝胶的细胞毒性
2.3 结果与讨论
2.3.1 PLG-g-mPEG/PBA的合成与表征
2.3.2 空白纳米凝胶和负载蛋白质的纳米凝胶的制备和表征
2.3.3 蛋白药物的释放行为及释放后蛋白的圆二光谱
2.3.4 蛋白药物的活性检测
2.3.5 细胞内吞
2.3.6 纳米凝胶的生物相容性
2.4 本章小结
第3章 缺氧敏感型超分子纳米凝胶用于RNA酶的细胞内递送以及乳腺癌的治疗
3.1 前言
3.2 实验材料和实验方法
3.2.1 实验材料
3.2.2 仪器与表征
3.2.3 PLG-g-mPEG/Azo和PLG-g-mPEG/βCD的合成
3.2.4 RNase-FITC和RNase-Cy5的合成
3.2.5 负载RNA酶的纳米凝胶的制备
3.2.6 纳米化RNA酶的体外释放
3.2.7 释放后RNA酶的圆二色谱
3.2.8 细胞培养
3.2.9 细胞毒性测试
3.2.10 纳米化RNA酶的细胞内吞
3.2.11 动物实验
3.2.12 纳米化RNA酶的药代动力学
3.2.13 体内抗肿瘤效果评价
3.2.14 组织的免疫组化分析
3.2.15 统计学分析
3.3 结果和讨论
3.3.1 PLG-g-mPEG/Azo和PLG-g-mPEG/βCD的合成与表征
3.3.2 超分子纳米凝胶的表征
3.3.3 纳米凝胶对RNA酶的担载
3.3.4 纳米化RNA酶的缺氧敏感释放
3.3.5 纳米化RNA酶的细胞内吞
3.3.6 纳米化RNA酶的细胞毒性
3.3.7 纳米化RNA酶的体内代谢
3.3.8 纳米化RNA酶的体内抑瘤效果
3.4 本章小结
第4章 生物可降解支架递送aPD-1抗体用于腹腔转移瘤的治疗
4.1 前言
4.2 实验材料和实验方法
4.2.1 实验材料
4.2.2 氧化葡聚糖的制备
4.2.3 细胞培养
4.2.4 四臂PEG-NH2的合成
4.2.5 植入支架的制备
4.2.6 植入支架的流变学行为
4.2.7 植入支架的体外降解和体外释放
4.2.8 细胞毒性的测定
4.2.9 DOX引发CT26细胞的免疫原性死亡
4.2.10 动物实验
4.2.11 生物可植入支架的体内降解和生物分布
4.2.12 体内抗肿瘤实验
4.2.13 流式细胞分析
4.2.14 组织的病理学分析
4.2.15 统计分析
4.3 结果与讨论
4.3.1 生物植入支架的体外表征
4.3.2 生物植入支架的体外释放的研究
4.3.3 生物植入支架的细胞毒性和DOX引发ICD
4.3.4 生物植入支架的体内降解和生物分布
4.3.5 CT26腹腔转移肿瘤模型的治疗效果
4.3.6 CT26腹腔转移肿瘤治疗后的免疫细胞分析
4.4 本章小结
第5章 全文总结和展望
5.1 全文总结
5.2 展望
参考文献
致谢
在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果
本文编号：3991119
【文章页数】：127 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第1章 绪论
1.1 蛋白药物在肿瘤治疗方面的应用
1.1.1 肿瘤的治疗
1.1.2 肿瘤微环境的特征
1.2 蛋白药物的体内递送方式-PEG化
1.3 蛋白药物递送的载体
1.3.1 脂质体类
1.3.2 纳米凝胶
1.3.3 高分子纳米粒子
1.3.4 无机纳米粒子
1.3.5 微球
1.3.6 水凝胶
1.4 敏感型高分子载体递送体系
1.4.1 pH敏感型高分子载体
1.4.2 温度敏感型高分子载体
1.4.3 酶敏感型高分子载体
1.4.4 葡萄糖敏感型高分子载体
1.5 凝胶与纳米凝胶的交联机制
1.5.1 物理交联
1.5.2 化学交联
1.6 本论文的选题目的以及主要研究内容
第2章 葡萄糖与pH双响应型纳米凝胶用于蛋白药物的高效递送
2.1 前言
2.2 实验材料和实验方法
2.2.1 实验材料
2.2.2 仪器与表征
2.2.3 PLG-g-mPEG/PBA的制备
2.2.4 空白纳米凝胶与负载蛋白的纳米凝胶的制备
2.2.5 体外释放与释放后蛋白药物的圆二色谱
2.2.6 纳米凝胶的细胞内吞
2.2.7 纳米凝胶的细胞毒性
2.3 结果与讨论
2.3.1 PLG-g-mPEG/PBA的合成与表征
2.3.2 空白纳米凝胶和负载蛋白质的纳米凝胶的制备和表征
2.3.3 蛋白药物的释放行为及释放后蛋白的圆二光谱
2.3.4 蛋白药物的活性检测
2.3.5 细胞内吞
2.3.6 纳米凝胶的生物相容性
2.4 本章小结
第3章 缺氧敏感型超分子纳米凝胶用于RNA酶的细胞内递送以及乳腺癌的治疗
3.1 前言
3.2 实验材料和实验方法
3.2.1 实验材料
3.2.2 仪器与表征
3.2.3 PLG-g-mPEG/Azo和PLG-g-mPEG/βCD的合成
3.2.4 RNase-FITC和RNase-Cy5的合成
3.2.5 负载RNA酶的纳米凝胶的制备
3.2.6 纳米化RNA酶的体外释放
3.2.7 释放后RNA酶的圆二色谱
3.2.8 细胞培养
3.2.9 细胞毒性测试
3.2.10 纳米化RNA酶的细胞内吞
3.2.11 动物实验
3.2.12 纳米化RNA酶的药代动力学
3.2.13 体内抗肿瘤效果评价
3.2.14 组织的免疫组化分析
3.2.15 统计学分析
3.3 结果和讨论
3.3.1 PLG-g-mPEG/Azo和PLG-g-mPEG/βCD的合成与表征
3.3.2 超分子纳米凝胶的表征
3.3.3 纳米凝胶对RNA酶的担载
3.3.4 纳米化RNA酶的缺氧敏感释放
3.3.5 纳米化RNA酶的细胞内吞
3.3.6 纳米化RNA酶的细胞毒性
3.3.7 纳米化RNA酶的体内代谢
3.3.8 纳米化RNA酶的体内抑瘤效果
3.4 本章小结
第4章 生物可降解支架递送aPD-1抗体用于腹腔转移瘤的治疗
4.1 前言
4.2 实验材料和实验方法
4.2.1 实验材料
4.2.2 氧化葡聚糖的制备
4.2.3 细胞培养
4.2.4 四臂PEG-NH2的合成
4.2.5 植入支架的制备
4.2.6 植入支架的流变学行为
4.2.7 植入支架的体外降解和体外释放
4.2.8 细胞毒性的测定
4.2.9 DOX引发CT26细胞的免疫原性死亡
4.2.10 动物实验
4.2.11 生物可植入支架的体内降解和生物分布
4.2.12 体内抗肿瘤实验
4.2.13 流式细胞分析
4.2.14 组织的病理学分析
4.2.15 统计分析
4.3 结果与讨论
4.3.1 生物植入支架的体外表征
4.3.2 生物植入支架的体外释放的研究
4.3.3 生物植入支架的细胞毒性和DOX引发ICD
4.3.4 生物植入支架的体内降解和生物分布
4.3.5 CT26腹腔转移肿瘤模型的治疗效果
4.3.6 CT26腹腔转移肿瘤治疗后的免疫细胞分析
4.4 本章小结
第5章 全文总结和展望
5.1 全文总结
5.2 展望
参考文献
致谢
在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果
本文编号：3991119
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