重组Pyrococcus furiosus葡聚糖磷酸化酶催化淀粉合成葡萄糖-1-磷酸
本文关键词:重组Pyrococcus furiosus葡聚糖磷酸化酶催化淀粉合成葡萄糖-1-磷酸
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【摘要】:将Pyrococcus furiosus来源的编码葡聚糖磷酸化酶的glg P基因进行稀有密码子优化,在E.coli中重组表达并催化淀粉合成G-1-P。在反应条件优化基础上,以不同的淀粉为底物,GPase均表现出较强的催化能力。在原料预处理、高浓度底物催化及补料催化研究的基础上,以7.5%玉米淀粉为初始底物,反应16 h后补入2.5%玉米淀粉,继续反应32 h,G-1-P产量达250.34 mmol·L~(-1),底物转化率达65.1%,与相同浓度的可溶性淀粉相比,G-1-P产量及转化率(252.9mmol·L~(-1),65.9%)均相近,表明廉价易得的玉米淀粉可以代替可溶性淀粉为原料生产G-1-P,大幅降低G-1-P生产的原料成本。
【作者单位】: 浙江大学生物质化工教育部重点实验室浙江大学化学工程与生物工程学院;
【关键词】: 葡聚糖磷酸化酶 葡萄糖--磷酸 酶催化 淀粉
【分类号】:Q814;O629
【正文快照】: 1引言葡萄糖-1-磷酸(G-1-P)广泛存在于动植物以及微生物中,在生物体中起着重要的作用[1],如G-1-P是糖原降解的第一个产物,在葡萄糖磷酸变位酶(EC 5.4.2.2)的作用下生成葡萄糖-6-磷酸,进入EMP途径[2];此外G-1-P还是合成核酸二磷酸葡萄糖(NDPG)的起始物质,NDPG可进一步用于各种
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