共振光散射探针技术灵敏检测生物及药物分子

发布时间：2017-08-18 14:35

  本文关键词：共振光散射探针技术灵敏检测生物及药物分子

  更多相关文章： DNA 共振光散射 药物 表面活性剂 金纳米粒子

【摘要】：共振光散射技术(RLS)具备操作简易和灵敏度高的突出优势,已经成功地运用于检测生物和药物分子。本论文利用RLS技术,选择一系列探针,检测药物和DNA的含量。具体内容包括:引入原花青素和溴化十六烷基吡啶(CPB),使DNA的RLS信号发生变化,在此基础上找到一种测定小牛胸腺DNA含量的新方法。这种方法的检出限已经达到纳克级别。在最佳的实验条件下(291 nm,pH 7.0),原花青素和CPB可以明显使DNA的RLS信号增强。在0.0084~3.36μg·mL 1浓度范围内,RLS强度增加值(RLS?I)与DNA浓度有很好的线性关系,线性方程为RLS?I=6.70+70.72c(c,μg·mL 1),检测限为2.27 ng·mL 1。分析了三种合成的DNA样品,回收率为102.3%~107.1%,RSD为1.4%~4.1%。在山姜素/桑色素和十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)存在的情况下,利用RLS技术来研究两个新的三元复合物,实现对DNA含量的灵敏检测。当pH 7.4时,由于山姜素/桑色素 CTAB和DNA之间发生了相互作用,致使RLS信号显著增加。针对山姜素/桑色素 CTAB DNA两个体系,RLS?I与DNA浓度之间均呈现良好的线性关系。检测限(S/N=3)分别为2.71 ng·mL 1和2.41 ng·mL-1,回收率分别是99.6%~102.6%和96.6%~100.5%。葛根素 AuNPs和槲皮素 AuNPs分别作为RLS探针,灵敏地测定了DNA含量。通过静电引力,DNA可以与葛根素 AuNPs或槲皮素 AuNPs形成复合物,引起RLS强度增强。槲皮素 AuNPs DNA的体系线性范围是0.0081~4.0μg·mL 1,葛根素 AuNPs DNA体系线性范围是0.0068~3.4μg·mL 1。测定三种合成样品,得到满意结果。回收率分别为98.8%~101.7%和98.7%~101.8%。利用合成的金纳米棒(AuNRs)作为RLS探针检测丁香酚含量。丁香酚的RLS信号很弱,加入AuNRs使其RLS的信号明显增强。紫外、RLS光谱和扫描电镜(SEM)的结果都表明丁香酚和AuNRs发生了相互作用,形成了丁香酚 AuNRs复合物。新的复合物是丁香酚和AuNRs之间通过配位键组装而成的。该方法的线性范围为0.043~10.60μg·mL 1,线性方程为RLS?I=92.8+70.4 c(c,μg·mL 1),检出限是7.28 ng·mL 1。运用此方法测定了合成样品的回收率为99.7%~104.2%,RSD为0.81%~1.19%(n=5)。运用此方法检测了咖喱粉中丁香酚的含量。基于AuNRs修饰山姜素,利用RLS技术灵敏检测山姜素。在pH 7.4的Tris HCl缓冲溶液中,山姜素和AuNRs通过静电引力相互结合形成山姜素 AuNRs聚合物,显示出高的RLS强度。在最佳实验条件下,体系的RLS强度增加值RLS?I与山姜素浓度(0.027~3.24μg·mL 1)呈良好的线性关系,检出限为1.79 ng·mL 1。应用该方法检测了合成样品中的山姜素,回收率为95.1%~103.7%,RSD为0.28%~3.9%(n=5)。应用共振光散射光谱技术建立了测定槲皮素含量的新体系。当pH=8.0,槲皮素和AuNPs通过静电引力相互作用,形成了槲皮素 AuNPs二元的复合物,导致共振光信号在467 nm出现最大值。RLS信号的增加值与槲皮素的浓度(0.0604~4.53μg·mL 1)成正比关系,检出限为1.49 ng·mL 1。该方法具备灵敏度高、简便和快速的优点。测定三种合成样品的回收率为96.7%~102.8%,RSD为0.7%~1.5%。
【关键词】：DNA 共振光散射 药物 表面活性剂 金纳米粒子
【学位授予单位】：长春师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：O657.3
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-12
• 第1章 绪论12-25
• 1.1 共振光散射光谱技术12-21
• 1.1.1 RLS的产生12-13
• 1.1.2 RLS的发展13
• 1.1.3 RLS优势13-14
• 1.1.4 RLS在生物大分子测定中的应用14-19
• 1.1.5 RLS在药物分子测定中的应用19
• 1.1.6 RLS在环境检测中的应用19
• 1.1.7 RLS在农药残留检测中的应用19-21
• 1.2 金纳米粒子21-24
• 1.2.1 金纳米粒子的概述21-22
• 1.2.2 金纳米粒子的发展22
• 1.2.3 金纳米粒子的合成方法22-24
• 1.2.4 金纳米粒子的应用24
• 1.3 本论文的研究内容24-25
• 第2章 原花青素 CPB DNA三元体系共振光散光谱及其应用25-38
• 2.1 前言25-26
• 2.1.1 原花青素25-26
• 2.1.2 十六烷基溴化吡啶26
• 2.2 实验部分26-28
• 2.2.1 仪器26
• 2.2.2 试剂26-27
• 2.2.3 实验过程27-28
• 2.3 结果与讨论28-38
• 2.3.1 原花青素 CPB DNA系统的RLS光谱28-29
• 2.3.2 原花青素紫外吸收光谱图29-31
• 2.3.3 原花青素 CPB DNA体系的紫外可见吸收光谱的研究31-32
• 2.3.4 条件最优化32-35
• 2.3.5 离子强度的影响35
• 2.3.6 共存物质的干扰35-36
• 2.3.7 工作曲线与检出限36
• 2.3.8 应用分析36-38
• 第3章 在山姜素/桑色素存在下对CTAB DNA体系的共振光散射光谱法的研究及应用38-50
• 3.1 前言38-40
• 3.1.1 山姜素38-39
• 3.1.2 桑色素39
• 3.1.3 CTAB39-40
• 3.2 实验部分40-41
• 3.2.1 仪器40
• 3.2.2 试剂40
• 3.2.3 实验过程40-41
• 3.3 结果与讨论41-50
• 3.3.1 山姜素/桑色素 CTAB DNA体系的RLS图41-43
• 3.3.2 pH的影响43-44
• 3.3.3 反应时间与加样顺序的影响44
• 3.3.4 CTAB浓度的影响44-45
• 3.3.5 山姜素/桑色素浓度的影响45-46
• 3.3.6 离子强度的影响46-47
• 3.3.7 共存物质的影响47
• 3.3.8 工作曲线与检出限47-48
• 3.3.9 应用分析48-50
• 第4章 槲皮素/葛根素 AuNPs DNA的共振光散射光谱的研究和应用50-62
• 4.1 前言50-51
• 4.1.1 槲皮素50
• 4.1.2 葛根素50-51
• 4.2 实验部分51-53
• 4.2.1 仪器51
• 4.2.2 试剂51-52
• 4.2.3 实验过程52-53
• 4.3 结果与讨论53-62
• 4.3.1 槲皮素/葛根素 AuNPs DNA体系的TEM图53-55
• 4.3.2 槲皮素/葛根素 AuNPs DNA体的共振光散射光谱55-56
• 4.3.3 条件最优化56-58
• 4.3.4 离子强度的影响58-59
• 4.3.5 共存物质的影响59-60
• 4.3.6 工作曲线和检出限60
• 4.3.7 样品分析60-62
• 第5章 金纳米棒作为共振光散射探针测定丁香酚62-74
• 5.1 前言62-63
• 5.2 实验部分63-65
• 5.2.1 仪器63
• 5.2.2 试剂63
• 5.2.3 实验过程63-65
• 5.3 结果与讨论65-74
• 5.3.1 金纳米棒及丁香酚 AuNRs体系的SEM图65-67
• 5.3.2 丁香酚 Au NRs体系共振光散射光谱研究67-68
• 5.3.3 丁香酚 Au NRs体系的紫外可见吸收光谱的研究68-69
• 5.3.4 条件最优化69-70
• 5.3.5 离子强度的影响70-71
• 5.3.6 共存物质的干扰71-72
• 5.3.7 工作曲线和检出限72
• 5.3.8 应用分析72-74
• 第6章 金纳米棒作为共振光散射技术探针灵敏检测山姜素74-84
• 6.1 前言74
• 6.2 实验部分74-76
• 6.2.1 仪器74
• 6.2.2 试剂74
• 6.2.3 实验过程74-76
• 6.3 结果与讨论76-84
• 6.3.1 金纳米棒及山姜素 AuNRs的大小和形貌76
• 6.3.2 山姜素 Au NRs体系的共振光散射光谱特征76-77
• 6.3.3 山姜素 Au NRs体系紫外可见吸收光谱的研究77-78
• 6.3.4 不同pH山姜素的紫外吸收光谱的研究78-79
• 6.3.5 条件最优化79-81
• 6.3.6 离子强度的影响81
• 6.3.7 共存物质的影响81-82
• 6.3.8 工作曲线与检出限82-83
• 6.3.9 样品检测83-84
• 第7章 金纳米粒子作为共振光散射探针测定槲皮素84-93
• 7.1 前言84
• 7.2 实验部分84-85
• 7.2.1 仪器84
• 7.2.2 试剂84
• 7.2.3 实验过程84-85
• 7.3 结果与讨论85-93
• 7.3.1 金纳米粒子及槲皮素 AuNPs体系的TEM图85-86
• 7.3.2 槲皮素 AuNPs体系共振光散射光谱研究86
• 7.3.3 槲皮素 AuNPs体系的紫外可见吸收光谱的研究86-87
• 7.3.4 不同pH槲皮素的紫外吸收光谱的研究87-88
• 7.3.5 条件最优化88-90
• 7.3.6 离子强度的影响90-91
• 7.3.7 共存离子的干扰91
• 7.3.8 工作曲线和检出限91-92
• 7.3.9 样品检测92-93
• 结论93-95
• 参考文献95-106
• 作者攻读硕士学位期间主要研究成果106-108
• 致谢108

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