基于链置换循环无标记检测端粒酶RNA的荧光法

发布时间：2017-09-27 02:39

  本文关键词：基于链置换循环无标记检测端粒酶RNA的荧光法

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【摘要】：以氧化石墨烯(GO)作为DNA载体和荧光猝灭剂,SYBR GreenⅠ(SGⅠ)为荧光信号探针,发夹核酸探针为分子识别探针,基于目标物启动的发夹核酸探针链置换循环反应,建立了一种利用荧光共振能量转移和链置换循环放大技术检测端粒酶RNA(h TR)的荧光新方法.发夹核酸探针hp DNA1和hp DNA2吸附在GO表面,嵌插在发夹DNA探针茎部的SGⅠ的荧光信号被GO猝灭.当人工合成的目标物(T1)存在时,T1与hp DNA1杂交打开hp DNA1的茎-环结构而引发hp DNA2与T1之间的链置换循环反应,由此累积产生大量的hp DNA1/hp DNA2杂交双链.刚性的双链DNA脱离GO表面,导致所嵌插的SGⅠ产生较强的荧光信号.基于荧光信号的变化,可定量检测0.2~50 nmol/L的T1,检出限为90 pmol/L.该方法为端粒酶RNA检测提供了一种高灵敏、高特异性且无需标记的荧光新途径.
【作者单位】： 陕西师范大学化学化工学院陕西省生命分析重点实验室;
【关键词】： 端粒酶RNA 链置换循环 荧光共振能量转移 无标记
【基金】：国家自然科学基金(批准号:21075079,21375086) 陕西省创新团队研究计划项目(批准号:2014KCT-28) 陕西师范大学中央高校基金项目(批准号:GK261001097) 长江学者高校创新团队项目(批准号:IRT-14R33)资助~~
【分类号】：Q55;O657.3
【正文快照】： 端粒酶(Telomerase)是一种核糖核蛋白酶,其主要功能是催化端粒(Telomere)末端不断延伸(TTAGGG)n序列,从而克服细胞分裂过程中的端粒缩短问题.研究表明,端粒酶在85%以上的人类肿瘤细胞中被高表达,而在正常体细胞中的表达量则极低甚至不表达.因此,端粒酶与细胞的恶性转化及持续

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 范宏亮;张涛;金伟;金钦汉;;基于脱氧核酶的无标记端粒酶检测新方法[J];高等学校化学学报;2015年04期

2 ZHANG LingHui;TANG Zhuo;;RNA-primed allele-specific PCR[J];Science China(Chemistry);2014年07期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 Jiuhai Wang;Zeeshan Ali;Nianyue Wang;Wenbiao Liang;Hongna Liu;Fu Li;Haowen Yang;Lei He;Libo Nie;Nongyue He;Zhiyang Li;;Simultaneous extraction of DNA and RNA from Escherichia coli BL 21 based on silica-coated magnetic nanoparticles[J];Science China(Chemistry);2015年11期

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 郭秋平;赵下雨;谢琴;王柯敏;万俊;袁宝银;谭誉宇;;基于免标记发夹型探针和核酸外切酶Ⅲ的荧光信号放大DNA检测[J];高等学校化学学报;2014年08期

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本文编号：927188