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代谢工程改造嗜热厌氧杆菌(Thermoanaerobacterium aotearoense SCUT27)强化氢气合成

发布时间:2021-01-17 16:00
  随着人类城市化和工业化水平的加快,人们对能源的需求越来越大。随着化石能源的快速消耗、不可再生和其在使用过程中造成的空气污染等问题越来越严重,寻找新的清洁可再生能源成为近些年科研人员研究的重点。在众多可再生能源中,氢气由于具有高燃烧值及燃烧产物无污染两大特性受到许多研究者青睐。本课题组筛选的Thermoanaerobacterium aotearoense SCUT27主要代谢产物有乙醇、乳酸、乙酸和氢气。该菌不仅可以利用多种碳源,甚至可以直接利用半纤维素进行代谢产物的合成及共利用戊糖和己糖,显示出突出的应用前景。但其氢气产量和得率仍不足以使之成为工业发酵菌株,因此,为提高菌株氢气产量和得率,需对其进行代谢工程改造。T.aotearoense SCUT27在合成乙醇、乳酸和氢气的过程中均需NADH提供电子,因此本研究首先从提高细胞内NADH的供给着手提高其氢气产量。在T.aotearoense SCUT27中,NADH依赖的还原态铁氧还蛋白:NADP+氧化还原酶(NADH-dependent reduced ferredoxin:NADP+ox... 

【文章来源】:华南理工大学广东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:138 页

【学位级别】:博士

【部分图文】:

代谢工程改造嗜热厌氧杆菌(Thermoanaerobacterium aotearoense SCUT27)强化氢气合成


嗜热厌氧杆菌代谢途径[70]

示意图,质粒,示意图,基因敲除


第二章强化T.aotearoenseSCUT27胞内NADH供给提高氢气产量15以其水解液作为底物,分别在摇瓶水平和发酵罐水平对T.aotearoenseSCUT27nfnAB基因敲除工程菌发酵廉价生物质水解液产氢的能力进行评估。2.2材料与方法2.2.1实验材料2.2.1.1菌株和质粒本章研究所用到的菌株和质粒见表2-1,其中T.aotearoenseSCUT27由本实验室筛选保藏,E.coliDH5α感受态细胞购自北京天根生化科技有限公司,载体pBluescriptIISK+购自Stratagene,作为构建nfnAB基因敲除载体的骨架:其结构示意图和质粒上多克隆位点(MCS)结构如图2-1和图2-2。图2-1质粒pBluescriptIISK+示意图Fig.2-1ThestructureofcloningvectorpBluescriptIISK+图2-2质粒pBluescriptIISK+多克隆位点Fig.2-2Themultiplecloningsite(MCS)ofvectorpBluescriptIISK+

示意图,质粒,位点,基因敲除


第二章强化T.aotearoenseSCUT27胞内NADH供给提高氢气产量15以其水解液作为底物,分别在摇瓶水平和发酵罐水平对T.aotearoenseSCUT27nfnAB基因敲除工程菌发酵廉价生物质水解液产氢的能力进行评估。2.2材料与方法2.2.1实验材料2.2.1.1菌株和质粒本章研究所用到的菌株和质粒见表2-1,其中T.aotearoenseSCUT27由本实验室筛选保藏,E.coliDH5α感受态细胞购自北京天根生化科技有限公司,载体pBluescriptIISK+购自Stratagene,作为构建nfnAB基因敲除载体的骨架:其结构示意图和质粒上多克隆位点(MCS)结构如图2-1和图2-2。图2-1质粒pBluescriptIISK+示意图Fig.2-1ThestructureofcloningvectorpBluescriptIISK+图2-2质粒pBluescriptIISK+多克隆位点Fig.2-2Themultiplecloningsite(MCS)ofvectorpBluescriptIISK+


本文编号:2983174

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