鸡Perilipin1基因的克隆及亚细胞定位

发布时间：2017-10-10 10:26

  本文关键词：鸡Perilipin1基因的克隆及亚细胞定位

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【摘要】：本研究旨在克隆鸡(Gallus gallus)脂滴包被蛋白基因(Perilipin1)的c DNA序列,并检测其在鸡前脂肪细胞分化过程中的亚细胞定位。本研究以7周龄肉鸡腹部脂肪组织为材料,采用RT-PCR和RACE的方法扩增并克隆了鸡Perilipin1基因的5'UTR、CDS和3'UTR片段,分析了该基因的结构;以鸡原代前脂肪细胞为材料,利用免疫荧光及激光共聚焦技术,在诱导分化的不同时间点(12~120 h),检测了鸡Perilipin1在前脂肪细胞中的表达位置。结果表明,本研究获得的鸡Perilipin1基因5'UTR、CDS和3'UTR序列总长度为2 379 bp,该基因由9个外显子、8个内含子组成(ATG位于第二外显子上);在鸡原代前脂肪细胞诱导分化过程中,Perilipin1始终包被在脂滴周围。综上,本研究成功克隆了鸡Perilipin1基因的完整c DNA序列并确定了Perilipin1在鸡前脂肪细胞分化过程中与脂滴的空间位置关系,该结果为深入开展鸡Perilipin1基因的功能研究,揭示鸡脂肪代谢的分子遗传机理提供了重要的理论依据。
【作者单位】： 东北农业大学动物科学技术学院/农业部鸡遗传育种重点实验室/黑龙江省普通高等学校动物遗传育种与繁殖重点实验室;
【关键词】： 鸡 脂滴包被蛋白 克隆 亚细胞定位
【基金】：国家自然科学基金项目(No.31201796) 高等学校博士学科点专项科研基金(No.20122325120008) 现代农业产业技术体系建设专项资金(CARS-42)
【分类号】：S831
【正文快照】： 脂滴包被蛋白基因(Perilipin1)(或称PLIN1,Peri)是1990年在大鼠(Rattus norvegicus)附睾脂肪细胞中发现的一种包被于中性脂滴外周表面,并且可以被蛋白激酶磷酸化的磷蛋白(Lu et al.,2001;Arimura et al.,2004;周纬男等,2016)。在哺乳动物中,脂滴包被蛋白由一个单拷贝的Perilip，

本文编号：1005837