过表达CD44v6基因对人大肠癌SW480细胞侵袭迁移能力的影响
发布时间:2017-10-12 07:40
本文关键词:过表达CD44v6基因对人大肠癌SW480细胞侵袭迁移能力的影响
【摘要】:目的:研究CD44v6基因过表达对SW480细胞侵袭和迁移能力的影响.方法:慢病毒介导的CD44v6过表达细胞(CD44v6组)和空载体对照细胞(NC组)由前期实验构建.采用荧光显微镜观察增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)表达、实时荧光定量PCR检测CD44v6 mRNA表达水平、免疫荧光检测Flag标签蛋白三种方法重新鉴定过表达细胞模型;CCK-8法检测细胞增殖活性;划痕试验和Transwell试验检测细胞侵袭和迁移能力.结果:绿色荧光蛋白观察显示细胞转染效率近100%;实时荧光定量PCR显示CD44v6组细胞CD44v6 mRNA表达水平较对照组.显著升高(P0.001);Flag标签蛋白免疫荧光染色显示过表达CD44v6蛋白主要定位于细胞膜.CCK-8结果显示2组细胞增殖无明显差异;划痕试验结果显示CD44v6组细胞划痕愈合指数较对照组显著增高(P0.05);Transwell试验结果显示CD44v6组细胞迁移和侵袭相关指数均较对照组显著增高(均P0.05),且CD44v6抗体处理后,CD44v6组细胞迁移和侵袭相关指数均较前显著减低(均P0.05).结论:CD44v6基因过表达能显著增强SW480细胞侵袭和迁移能力.
【作者单位】: 温州医科大学附属第一医院肿瘤外科;
【关键词】: 大肠癌 侵袭 转移 CDv 过表达
【基金】:温州市科技局基金资助项目,No.Y20140713 温州医科大学附属第一医院科研孵化基金资助项目,No.FHY2014013~~
【分类号】:R735.34
【正文快照】: ■背景资料C D 4 4 v 6是最为公认的大肠癌肿瘤干细胞标志物之一,被认为与肿瘤侵袭转移及不良预后相关.但目前研究大多局限于临床相关性水平,缺乏细胞及动物水平的功能机制研究.建立可靠的细胞模型,对深入研究分子机制具有重要意义. ■同行评议者肖秀英,副主任医师,上海交通,
本文编号:1017520
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