暗黑鳃金龟气味结合蛋白HparOBP15a基因的克隆及功能分析

发布时间：2017-10-14 01:33

  本文关键词：暗黑鳃金龟气味结合蛋白HparOBP15a基因的克隆及功能分析

  更多相关文章： 暗黑鳃金龟 气味结合蛋白 组织表达 蛋白纯化 荧光竞争结合实验

【摘要】：【目的】暗黑鳃金龟Holotrichia parallela通过气味结合蛋白(odorant binding protein,OBP)识别性信息素和植物挥发物准确而迅速地定位配偶、寄主植物。本研究通过克隆暗黑鳃金龟气味结合蛋白15a(Hpar OBP15a)基因,解析该基因的编码蛋白特征、组织表达模式及与寄主植物气味等化合物的结合特性方面的研究,为阐明暗黑鳃金龟基于嗅觉识别的寄主植物选择机理奠定理论基础。【方法】根据暗黑鳃金龟成虫触角转录组测序的结果,利用RT-PCR克隆了Hpar OBP15a基因;Real-time PCR方法分析了该基因在成虫不同部位的表达量差异;荧光竞争结合测定了Hpar OBP15a蛋白和58种候选化合物的结合特征。【结果】暗黑鳃金龟Hpar OBP15a基因全长534 bp,编码147个氨基酸,Gen Bank登录号为AK1834747。Hpar OBP15a在触角中特异表达,且在雌虫触角中表达量显著高于雄虫。在被测的58种化合物中,Hpar OBP15a与46种气味化合物具有较好的亲和性,其中与十二烷、十二醇结合能力最强,其解离常数分别为8.5和11.3μmol/L;同时,对性信息素(L-异亮氨酸甲酯和R-芳樟醇)也有一定的结合能力(解离常数分别为21.0和18.5μmol/L)。【结论】Hpar OBP15a具有广泛的气味结合谱,其中对榆树挥发物十二烷的结合能力最强,因此该蛋白可能在暗黑鳃金龟对榆树的定位过程中具有重要作用。
【作者单位】： 东北农业大学农学院;中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室;
【关键词】： 暗黑鳃金龟 气味结合蛋白 组织表达 蛋白纯化 荧光竞争结合实验
【基金】：国家自然科学基金项目(31572007;31371997)
【分类号】：S433
【正文快照】： 植物病虫害生物学国家重点实验室,北京100193)嗅觉系统在昆虫生存和适应环境中均具有重要作用,能从成千上万种不同气味中识别出某些特异性气味物质(王桂荣等,2002)。昆虫对气味的识别主要涉及气味结合蛋白(odorant binding proteins,OBPs)、气味受体(odorant receptors,ORs)、

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 赵彭彬;花生蛴螬(暗黑鳃金龟)发生规律及某防治[J];昆虫知识;1983年05期

2 徐建国,范惠,张明考,杨恩华,郭琳;暗黑鳃金龟生活习性观察及防治技术研究[J];植保技术与推广;2002年11期

3 胡慧芳;;长治市滨河公园草坪暗黑鳃金龟幼虫发生情况调查[J];草原与草坪;2011年06期

4 朱琳;刘玉升;刘宁;高尚坤;郑继法;;暗黑鳃金龟甲幼虫肠道细菌分离及鉴定[J];中国微生态学杂志;2012年07期

5 史树森;崔娟;徐伟;宋鹏翔;李维宇;武婷婷;张萌;;几种药剂对夏大豆田暗黑鳃金龟幼虫防治效果评价[J];农药;2013年12期

6 罗益镇;;暗黑鳃金龟发生规律和防治方法[J];植物保护学报;1981年03期

7 罗益镇;;鲁西南豆区暗黑鳃金龟发生规律及防治策略的商榷[J];中国油料作物学报;1986年02期

8 吴立民,陈祖愉,徐增兰;花生蛴螬的发生与防治[J];植物保护;1986年01期

9 王克;暗黑鳃金龟的生活习性及防治技术[J];植保技术与推广;1995年01期

10 史树森;崔娟;宋鹏翔;臧冬初;李维宇;武婷婷;;夏大豆田暗黑鳃金龟发生危害规律研究[J];大豆科学;2014年01期

中国重要会议论文全文数据库 前4条

1 王庆雷;冯晓洁;席国成;张平;李靖宇;刘福顺;吴娱;刘春琴;;暗黑鳃金龟卵孵化影响因素研究[A];“创新驱动与现代植保”——中国植物保护学会第十一次全国会员代表大会暨2013年学术年会论文集[C];2013年

2 刘春琴;张平;席国成;冯晓洁;李靖宇;刘福顺;吴娱;王庆雷;;室内模拟花生田生态环境对暗黑鳃金龟生长习性的影响研究[A];“创新驱动与现代植保”——中国植物保护学会第十一次全国会员代表大会暨2013年学术年会论文集[C];2013年

3 蒋海霖;殷济书;朱绍义;汤东兵;袁鹏举;吴兴德;;暗黑鳃金龟发生规律与卵孢白僵菌防治技术研究[A];“植物保护21世纪展望”——植物保护21世纪展望暨第三届全国青年植物保护科技工作者学术研讨会文集[C];1998年

4 姜祖诚;;暗黑臀钩土蜂保护利用技术研究[A];全国生物防治学术讨论会论文摘要集[C];1995年

中国重要报纸全文数据库 前1条

1 新沂市植保站 杨秀梅;看虫态防治花生田暗黑鳃金龟[N];江苏农业科技报;2009年

中国博士学位论文全文数据库 前3条

1 圣平;暗黑鳃金龟不同发育阶段肠道微生物及糖苷水解酶多样性研究[D];华中农业大学;2014年

2 黄胜威;暗黑鳃金龟幼虫肠道微生物分子多态性及纤维素降解菌多样性研究[D];华中农业大学;2012年

3 赵丹;暗黑鳃金龟幼虫中肠蛋白基因的分离及表达分析[D];河北农业大学;2014年

，

本文编号：1028270