MiR-145调控c-Myc基因表达影响鼻咽癌细胞的增殖

发布时间：2017-10-15 11:27

  本文关键词：MiR-145调控c-Myc基因表达影响鼻咽癌细胞的增殖

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【摘要】：【目的】探究miR-145对鼻咽癌细胞增殖的影响以及其可能的机制。【方法】用实时定量PCR(RT-qPCR)法检测在NP69,CNE-1,CNE-2及CNE-2Z细胞系中mi R-145和c-Myc的表达水平。分别将miR-Negative control、miR-145 mimics转染CNE-1细胞,用qRT-PCR法检测miR-145转染效果,以CCK-8检测转染后细胞的增殖情况,通过碘化丙啶(PI)染色检测细胞周期。利用RNAi(RNAinterference)技术将si-NC与si-c-Myc转入CNE-1细胞中,然后检测细胞的增殖能力和细胞周期情况。最后通过双荧光素酶报告基因实验,共转染miR-145与c-Myc 3’UTR报告载体,检测miR-145与基因c-Myc的关系。【结果】与鼻咽正常上皮细胞相比,miR-145在鼻咽癌细胞系中明显下调。miR-145可以明显抑制CNE-1细胞的生长(3d:1.03±0.02,P0.05;4d:1.79±0.02,P0.01),并使细胞周期G1期阻滞((74.43±1.55)%;(69.98±1.16)%,P0.01),miR-145可以直接作用于c-Myc的3’UTR区域,抑制c-Myc的表达。c-Myc下调可明显抑制CNE-1细胞的生长(3d:0.80±0.02,P0.01;4d:1.68±0.4,P0.01),使细胞G1期阻滞((69.77±0.87)%;(54.10±2.26)%,P0.01)。miR-145能直接靶向c-Myc,调控c-Myc的表达。mi R-145调控鼻咽癌细胞增殖的效应是通过靶向调控c-Myc的表达发挥作用的。【结论】(1)miR-145在鼻咽癌中低表达。(2)miR-145可以使鼻咽癌细胞的增殖抑制并阻滞细胞周期于G1期。(3)干扰c-Myc后鼻咽癌细胞的增殖也受到抑制并阻滞细胞周期于G1期。(4)miR-145可以靶向作用于c-Myc的3’UTR区,c-Myc是miR-145的直接靶基因。(5)miR-145通过靶向作用于c-Myc抑制鼻咽癌细胞的生长增殖,此条通路可为深入探索鼻咽癌的诊断和治疗提供可能的靶点。
【关键词】：鼻咽癌 mi R-145 c-Myc 增殖 细胞周期
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R739.63
【目录】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-9
• 前言9-12
• 参考文献11-12
• 临床资料与方法12-18
• 结果18-28
• 讨论28-30
• 结论30-31
• 参考文献31-33
• 综述33-39
• 参考文献37-39
• 攻读学位期间发表的文章39-40
• 英文缩略词表40-41
• 致谢41-42

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本文编号：1036861