RNAi沉默Rac1基因对结肠癌细胞增殖及裸鼠成瘤的影响

发布时间：2017-10-16 06:22

  本文关键词：RNAi沉默Rac1基因对结肠癌细胞增殖及裸鼠成瘤的影响

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【摘要】：目的探讨RNAi沉默Rac1基因对结肠癌细胞增殖及裸鼠成瘤的影响。方法 1细胞实验:体外培养结肠癌细胞SW480,随机分为空白对照组、阴性对照组、shRNA-Rac1组,阴性对照组、shRNA-Rac1组分别转染空载质粒慢病毒、shRNA-Rac1慢病毒。采用RT-PCR技术、Western blotting法检测各组Rac1 mRNA及其蛋白表达;采用MTT法检测各组转染24、48、72、96 h的细胞增殖情况。2动物实验:取shRNA-Rac1组、阴性对照组转染后细胞分别接种于裸鼠皮下,建立结肠癌裸鼠移植瘤模型(分别记为观察组、对照组),观察裸鼠成瘤及移植瘤生长情况,喂养35天脱臼处死,完整剥离肿瘤组织,称取瘤体质量并测量肿瘤体积。同时检测瘤体Rac1蛋白表达情况。结果 1细胞实验:与阴性对照组比较,shRNA-Rac1组Rac1 mRNA及其蛋白表达明显降低(P均0.05);与阴性对照组比较,shRNA-Rac1组各时间点细胞增殖速度明显降低(P均0.05)。2动物实验:对照组癌细胞接种4~8天均可见瘤体形成,观察组接种35天仅2只成瘤,且瘤体形成时间较对照组晚10天。接种35天,观察组、对照组瘤体体积分别为(32.54±43.13)、(948.13±523.50)mm3,瘤体质量分别为(0.023±0.031)、(0.873±0.372)g,两组比较P均0.01。与对照组比较,观察组瘤体组织Rac1蛋白阳性表达率明显降低(P0.05)。结论抑制Rac1表达能降低结肠癌细胞增殖速度,抑制裸鼠移植瘤生长。
【作者单位】： 海南医学院附属医院;海南医学院;
【关键词】： 结肠癌 Rac RNA干扰 裸鼠成瘤 细胞增殖
【基金】：国家自然科学基金资助项目(81260321)
【分类号】：R735.35
【正文快照】： 结肠癌是临床常见的恶性肿瘤之一,在我国其病死率居所有恶性肿瘤的第五位,复发和转移是患者死亡的主要原因[1,2]。Rac1是Rac亚家族的一个重要成员,是细胞内重要的信号转导分子。近年研究发现,Rac1在人类大部分侵袭性肿瘤中高表达,如胃癌、乳腺癌、肺癌等[3~8],并与肿瘤的侵袭

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本文编号：1041107