甘肃红豆草BAN基因克隆与双标记选择表达载体构建

发布时间：2017-10-17 13:37

  本文关键词：甘肃红豆草BAN基因克隆与双标记选择表达载体构建

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【摘要】：为探讨编码花青素还原酶BAN基因的功能及其与缩合单宁合成的关系,根据BAN基因序列设计特异引物,采用RT-PCR技术获得甘肃红豆草BAN的相似基因;利用生物信息学相关软件分析,预测其c DNA序列编码的蛋白质结构和功能;采用Real-time PCR法检测该基因在甘肃红豆草各组织中的表达;构建含有BAN基因的双标记选择载体。结果表明,克隆的BAN基因与报道的BAN基因序列相似性达到99.41%,其ORF长为1 020 bp,可编码339个氨基酸残基,具有花青素还原酶保守结构域和重要功能位点;三级结构预测显示,预测模型与花青素还原酶单体结构(C2RH8A)相似,属于短链脱氢/还原酶超家族成员,表明其可能具有花青素还原酶的功能。BAN基因在各组织中均表达,其表达量依次为荚果、叶、蕾、花、茎。以此为靶序列,构建携带抗除草剂bar和绿色荧光蛋白GFP基因的双标记选择植物表达载体,将为缩合单宁合成、代谢的进一步研究及抗除草剂和抗臌胀病牧草新品种的培育奠定基础。
【作者单位】： 甘肃农业大学草业学院/草业生态系统教育部重点实验室/中-美草地畜牧业可持续发展研究中心;河南科技大学农学院;甘肃农业大学生命科学院;西北民族大学生命科学与工程学院;
【关键词】： 甘肃红豆草 基因克隆 表达分析 载体构建
【基金】：甘肃省科技厅科技支撑计划项目(1104NKCA087) 国家自然科学基金项目(31502012)
【分类号】：S541.4
【正文快照】： 缩合单宁(原花青素)是植物类黄酮生物合成途径的终端产物,在自然界中广泛存在,主要存在于植物的果实、种子、花和外皮中,也存在于蔬菜、水果和粮食中。缩合单宁也是一种重要的生物源强效抗氧化剂和自由基清除剂,其在生物体内具有抗紫外线、抗病、抗虫,清除自由基,调节种子休眠

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本文编号：1049159