小鼠围着床期输卵管与子宫中差异基因表达

发布时间：2017-10-19 14:21

  本文关键词：小鼠围着床期输卵管与子宫中差异基因表达

  更多相关文章： 着床 接受态 蜕膜化 异位妊娠

【摘要】：输卵管是雌性生殖系统的重要组成部分,是受精发生的场所,具有摄取卵子、运输精子及胚胎进入子宫等功能。异位妊娠是指胚胎在子宫腔外着床发育的异常妊娠过程,绝大多数发生在输卵管壶腹部。异位妊娠占怀孕妇女的1.5%-2%,且还有逐步上升的趋势,是临床上导致产妇妊娠早期死亡的一个主要原因。最近研究发现,输卵管微环境异常可能是导致输卵管异位妊娠发生的关键机制。所以深入研究输卵管参与生殖过程的分子机制对于预防和治疗临床上相关疾病迫在眉睫。本实验选用2-3月龄性成熟的SPF级CD-1小鼠进行合笼,在妊娠第4天和第5天取子宫和输卵管壶腹部取材,利用原位杂交和免疫组化技术检测与胚胎着床相关的分子在输卵管及子宫中的表达,并进行比较。实验结果表明,妊娠第4天,输卵管壶腹部上皮中ERα高表达,但在基质和肌层中表达很弱;PR在输卵管上皮几乎不表达,仅在基质和肌层中表达。E-cadherin和MUC-1等非接受态相关的分子在妊娠第4天和第5天输卵管壶腹部上皮中表达均高于子宫腔上皮。与子宫相比,Ltf在第4天输卵管壶腹部也表达很高。接受态相关的MSX1、SGK1、Hand2和p-STAT3等在子宫中表达,但在输卵管壶腹部不表达。BMP2、Egr1和COX2等蜕膜化相关基因在输卵管壶腹部几乎不表达。我们的结果表明,在胚胎着床期间小鼠输卵管壶腹部上皮中非接受态分子高表达,而接受态分子几乎不表达,说明此时的输卵管并不利于胚胎发育。我们的结果将为建立输卵管异位妊娠动物模型等提供理论依据。
【关键词】：着床 接受态 蜕膜化 异位妊娠
【学位授予单位】：华南农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S814.1
【目录】：

• 摘要2-3
• Abstract3-4
• 中英文缩略词表4-7
• 1 前言7-19
• 1.1 输卵管与生殖7-9
• 1.1.1 输卵管的解剖学及组织学7
• 1.1.2 输卵管的功能7-8
• 1.1.3 输卵管的微环境及输卵管液的成分与功能8-9
• 1.1.4 输卵管异位妊娠9
• 1.2 胚胎着床9-18
• 1.2.1 子宫接受态与胚胎着床9-10
• 1.2.2 类固醇激素对子宫接受态的调控10-11
• 1.2.3 胚胎着床期间母胎界面抵抗着床相关分子机制11-13
• 1.2.4 子宫内膜接受态建立的分子机制13-16
• 1.2.5 细胞增殖与胚胎着床16
• 1.2.6 参与调控胚胎着床的其它分子机制16-18
• 1.3 本研究的目的和意义18-19
• 2 材料与方法19-32
• 2.1 实验动物19
• 2.2 动物材料的收集与保存19
• 2.3 原位杂交探针制备和序列分析19-26
• 2.3.1 菌种和主要试剂19
• 2.3.2 PCR引物设计19-20
• 2.3.3 组织总RNA的提取20-21
• 2.3.4 反转录合成cDNA21
• 2.3.5 PCR扩增21-22
• 2.3.6 PCR产物回收22-23
• 2.3.7 PCR产物与pGEM-T载体的连接23
• 2.3.8 重组质粒转化感受态细胞及鉴定23-25
• 2.3.9 阳性克隆质粒的提取25
• 2.3.10 目的片段的PCR扩增和回收25-26
• 2.3.11 地高辛标记cRNA探针26
• 2.4 原位杂交26-30
• 2.4.1 原位杂交相关器皿的准备26-27
• 2.4.2 冰冻切片27
• 2.4.3 原位杂交相关试剂的配制27-29
• 2.4.4 原位杂交过程29-30
• 2.5 免疫组织化学30-32
• 3 结果32-41
• 3.1 胚胎着床窗口期类固醇激素受体表达的定位32
• 3.2 胚胎着床期Muc-1、E-Cadherin与Ltf的表达32-34
• 3.3 胚胎着床期细胞增殖和抗凋亡程度比较34-35
• 3.4 胚胎着床期接受态相关分子的表达35-39
• 3.5 蜕膜化相关分子的检测39-41
• 4 讨论41-45
• 4.1 类固醇激素与输卵管异位妊娠41-42
• 4.2 接受态分子与输卵管异位妊娠42-43
• 4.3 非接受态分子与输卵管异位妊娠43-45
• 5 结论45-46
• 致谢46-47
• 参考文献47-53

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 孙晓溪;;胚胎植入相关因子与输卵管妊娠发生的关系[J];生殖医学杂志;2014年03期

，

本文编号：1061585