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金属硫蛋白2基因在红花中表达的初步研究

发布时间:2017-10-21 08:33

  本文关键词:金属硫蛋白2基因在红花中表达的初步研究


  更多相关文章: 红花 金属硫蛋白 油体 Southern blotting检测 根瘤农杆菌 重组质粒


【摘要】:目的获得转金属硫蛋白2(metallothionein 2,MT2)红花植株,为MT药用蛋白的生产奠定基础。方法采用Nco I/HindⅢ酶切pEASY-oleosin-MT获得oleosin-MT融合基因,将其插入到植物油体高效表达载体pOP上,构建重组质粒pOP-oleosin-MT,进行PCR和双酶切鉴定。采用冻融法将重组质粒pOP-oleosin-MT转入根瘤农杆菌EHA105中,通过农杆菌介导法转化红花,对转MT基因红花植株进行PCR检测及Southern blotting检测。结果成功构建了MT基因的植物油体表达载体pOP-oleosin-MT,获得了3株PCR检测呈阳性的转MT基因红花植株。结论建立了完善的红花再生体系,获得了转MT基因的红花植株。
【作者单位】: 吉林农业大学生命科学学院;吉林农业大学生物反应器与药物开发教育部工程研究中心;通化市第一中学;
【关键词】红花 金属硫蛋白 油体 Southern blotting检测 根瘤农杆菌 重组质粒
【基金】:国家高技术研究发展计划(863)项目(2011AA100606) 国家自然科学基金资助项目(31201237) 吉林省教育厅“十三五”科学技术研究项目重点项目(吉教科合字[2016]179号) 吉林农业大学大学生创新创业项目(201610193046,201410193045) 吉林省科技厅中青年领军人才及优秀创新团队项目(20111815) 教育部博士点基金-青年教师基金项目(20122223120002)
【分类号】:S567.219;Q943
【正文快照】: 金属硫蛋白(metallothionein,MT)是一类低Cd的金属蛋白首次在马肾脏细胞中被发现[2]。通过对相对分子质量(6~7 ku)、富含半胱氨酸,可与大金属硫蛋白进行提纯发现,其含有大量的半胱氨酸残量金属离子(如Zn2+,Cd2+和Cu2+)相结合的独特基和金属,并因此将其命名为“metallothionein

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本文编号:1072303

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