低钙敏感拟南芥自然变异种的筛选及相关基因的粗定位

发布时间：2017-10-21 17:12

  本文关键词：低钙敏感拟南芥自然变异种的筛选及相关基因的粗定位

  更多相关文章： 拟南芥 自然变异种 低钙 表型分析 图位克隆技术

【摘要】：为了能够更好地理解植物在低钙逆境中生长发育的分子机制,本实验主要以拟南芥自然变异种为材料,通过对96种自然变异种进行筛选,筛选出一株低钙敏感自然变异种Wt-5,对其进行表型分析,发现Wt-5与拟南芥野生型Col-0相比,在低钙培养基(含有0μM CaCl2、20μM CaCl2)中具有根短、叶小而且黄的表型,而在CK培养基(含有1mM CaCl2)中表型无明显差异。通过原子吸收光谱的方法测定自然变异种Wt-5体内的总钙含量,发现生长在CK培养液中的Wt-5和野生型Col-0相比,体内总钙含量低于Col-0；当给予低钙处理后,发现在叶片(大叶或小叶)中,Wt-5体内的总钙含量仍低于Col-0。我们将Wt-5与生态型Ler进行杂交,得到F1和F2代植株,经分析显示Wt-5为单基因隐性突变体。再利用图位克隆技术,将突变位点粗定位至拟南芥2号染色体18.14M -19.5Mbp范围内。
【关键词】：拟南芥 自然变异种 低钙 表型分析 图位克隆技术
【学位授予单位】：内蒙古大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：Q943.2
【目录】：

• 摘要4-5
• abstract5-9
• 符号说明9-10
• 一 引言10-18
• 1.1 钙离子对植物的生理作用10
• 1.2 植物吸收钙离子的分子机制10-15
• 1.2.1 钙调素及类钙调素蛋白(CaM)11-12
• 1.2.2 钙调磷酸酶B类蛋白(CBL)12-13
• 1.2.3 钙依赖性蛋白激酶(CDPK)13-15
• 1.3 钙资源现状15-16
• 1.3.1 酸雨对土壤中钙的淋失15-16
• 1.3.2 酸雨对植物中钙的影响16
• 1.4 图位克隆的基本原理16-17
• 1.5 本研究的目的与意义17-18
• 二 材料与方法18-27
• 2.1 材料18-22
• 2.1.1 植物材料18
• 2.1.2 主要试剂18
• 2.1.3 主要溶液与培养基的配制18-19
• 2.1.4 引物列表19-22
• 2.2 方法22-27
• 2.2.1 拟南芥的播种与培养22-23
• 2.2.2 自然变异种Wt-5的筛选23
• 2.2.3 Wt-5水培表型观察23
• 2.2.4 原子吸收测定总钙含量23-24
• 2.2.5 CTAB法提取DNA24
• 2.2.6 Wt-5相关基因定位(图位克隆)24-27
• 三 结果与分析27-35
• 3.1 自然变异种Wt-5的表型分析27-29
• 3.2 Wt-5总钙含量测定结果29-30
• 3.3 Wt-5相关基因粗定位30-35
• 四 结论与讨论35-37
• 4.1 结论35
• 4.2 讨论35-37
• 参考文献37-40
• 致谢40

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本文编号：1074436