产肌醇酿酒酵母基因工程菌的构建

发布时间：2017-10-24 03:08

  本文关键词：产肌醇酿酒酵母基因工程菌的构建

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【摘要】：【目的】过表达酿酒酵母肌醇合成关键酶基因INO1,促进肌醇合成,构建能够分泌肌醇的基因工程菌株。【方法】构建r DNA介导的INO1基因多拷贝整合表达载体p URIH,电转化酿酒酵母Y01菌株,构建工程菌株YI2-1和YI2-2,荧光定量PCR方法分析INO1基因表达量。敲除Kan MX抗性基因,HPLC检测重组菌发酵液中肌醇含量。【结果】获得INO1基因过表达菌株YI2-1和YI2-2,YI2-1的INO1基因表达量是出发菌Y01的16.235倍。敲除Kan MX抗性基因的菌株命名为YI2-1△KP,初步检测YI2-1△KP产肌醇量为627 mg/L。【结论】r DNA介导的INO1基因多拷贝整合表达载体p URIH能够有效地过表达目的基因;过表达菌株合成的肌醇不仅能满足自身的需要,而且能够向胞外分泌,具有潜在的工业应用价值。
【作者单位】： 泉州医学高等专科学校;福建师范大学生命科学学院;
【关键词】： 肌醇 过表达 Sc INO 基因工程菌 酿酒酵母
【基金】：福建省医药卫生科研人才培养项目资助计划(No.2014-1-87) 泉州医学高等专科学校“国家骨干院校建设”重点资助科研项目(No.XJ1317) 国家现代农业产业技术体系建设专项资金资助项目(No.CARS-20-4-4)~~
【分类号】：Q78;Q93
【正文快照】：

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本文编号：1086722