丹参转基因毛状根离体培养体系的建立及分析

  本文关键词：丹参转基因毛状根离体培养体系的建立及分析，由笔耕文化传播整理发布。

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刊刊名： 中国中药杂志
China Journal of Chinese Materia Medica
主办：  中国药学会
周期：  半月
出版地：北京市
语种：  中文
开本：  大16开
ISSN： 1001-5302
CN：   11-2272/R
邮发代号： 2-45

历史沿革：
现用刊名：中国中药杂志
曾用刊名：中药通报
创刊时间：1955

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丹参转基因毛状根离体培养体系的建立及分析

作者： 张夏楠 ; 崔光红 ; 蒋喜红 ; 黄璐琦

关键词： 丹参 毛状根 转基因 离体培养

摘要：
    目的：建立起丹参的转基因毛状根诱导及离体培养体系。方法：考察了不同外植体、不同农杆菌侵染时间和共培养时间诱导丹参毛状根的效率,共培养外植体用400 g.L-1Cef水除菌5 min,接种在MS＋400 g.L-1Cef＋2.5 g.L-1Hyg的固体培养基上,完全除菌后转接入6,7-V＋2.5 g.L-1Hyg液体培养基继代培养,GFP荧光检测阳性毛状根,PCR检测农杆菌特征基因rolC,并测定不同生长时期的毛状根干重和二氢丹参酮I的积累。结果：用丹参叶片基部诱导毛状根,成功率可达到93.3%;农杆菌侵染10 min诱导效率最高为63.3%;共培养2～3 d诱导效果最好;PCR结合GFP荧光检测的方法鉴定阳性转基因材料具有较高的可信性;丹参毛状根生物量变化与次生代谢物积累之间有着紧密联系。结论：成功建立起丹参转基因毛状根离体培养体系,为进一步的基因工程应用打下基础。

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