大豆△~1-吡咯啉-5-羧酸合成酶基因GmP5CS1和GmP5CS2的克隆与过表达载体构建

发布时间：2017-10-28 05:27

  本文关键词：大豆△~1-吡咯啉-5-羧酸合成酶基因GmP5CS1和GmP5CS2的克隆与过表达载体构建

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【摘要】：利用同源克隆方法从强耐旱栽培大豆(Glycine max)品种齐黄22中克隆得到2个编码大豆△1-吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS)的基因,分别命名为Gm P5CS1和Gm P5CS2。氨基酸序列分析发现,Gm P5CS1包含1个长度为2 163 bp的ORF,编码720个氨基酸,等电点p I为6.70,分子量大小为78.38 k Da;Gm P5CS2包含1个长度为2 271 bp的ORF,编码756个氨基酸,等电点p I为6.10,分子量大小为82.18 k Da。与NCBI公布的部分物种蛋白质序列比对发现,Gm P5CS1与紫花苜蓿(Medicago sativa)的亲缘关系最高,Gm P5CS2与豇豆(Vigna unguiculata)的亲缘关系最高。组织表达分析表明,Gm P5CS1与Gm P5CS2基因在大豆的各个组织中均有表达,其中叶和根中的表达量相对较高,茎中表达量次之,花和籽粒中的表达量相对较低。利用Gateway技术得到植物过表达载体p Earley Gate103-Gm P5CS,再转入根癌农杆菌EHA105中,为Gm P5CS基因的转化及功能分析奠定了基础。
【作者单位】： 南京农业大学大豆研究所/国家大豆改良中心/农业部大豆生物学与遗传育种重点实验室/作物遗传与种质创新国家重点实验室;
【关键词】： 大豆 GmPCS基因 Gateway技术
【基金】：国家转基因生物新品种培育科技重大专项(2014ZX08004) 国家自然科学基金(31301340,31301343) 国家现代农业产业技术体系(CARS-004-PS10) 江苏省农业科技支撑计划(BE2013350) 长江学者和创新团队发展计划(PCSIRT13073) 江苏省现代作物生产协同创新中心(JCIC-MCP)
【分类号】：S565.1
【正文快照】： 植物在生长发育过程中,经常会受到各种非生物胁迫的影响。非生物胁迫从模式上划分可以分为两种:一种是渗透胁迫,通常由干旱、盐渍和冷害所引起;另一种是氧化胁迫,通常由离子毒害引发[1]。植物在受到盐或者干旱等非生物胁迫时,植物细胞内会迅速合成并积累大量的渗透物质如脯氨，

本文编号：1106853