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丹参多酚氧化酶基因的克隆及表达分析

发布时间:2017-10-30 15:03

  本文关键词:丹参多酚氧化酶基因的克隆及表达分析


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【摘要】:前期研究发现多酚氧化酶(PPO)能正向调控丹酚酸B合成,该研究运用RACE技术,从丹参毛状根中克隆到多酚氧化酶基因(SmPPO,GenBank登录号为KF712274)全长序列,其cDNA全长1 930bp,开放阅读框为1 770bp,编码589个氨基酸。将SmPPO与管状花目其它4个物种进行氨基酸序列比对,在N端类囊体转移结构域中发现都存在2个N-豆蔻酰化位点。在丹参毛状根培养液中加入不同诱导因子,利用实时荧光定量PCR检测,发现该基因在酵母提取物处理中表达量显著上调,但在银离子、抗坏血酸和L-半胱氨酸处理中表达受到明显抑制。运用HPLC技术同步检测毛状根中丹酚酸B含量,显示出与基因表达相同的变化趋势。研究表明,丹参中多酚氧化酶基因(SmPPO)对丹酚酸B的合成具有正向调控作用。
【作者单位】: 旱区作物逆境生物学国家重点实验室中药指纹图谱与天然产物国家地方联合工程研究中心西北农林科技大学生命科学学院;
【关键词】丹参 多酚氧化酶 基因克隆 序列全长 基因表达
【基金】:国家自然科学基金(81373908) 陕西省自然科学基金(2015JM3092;2016JM8108) 中央高校基本科研业务费(2452016003)
【分类号】:S567.53
【正文快照】: 多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)是由核基因编码的含铜金属酶,广泛存在于植物、真菌和昆虫中。它们能氧化多酚类化合物生成不稳定的醌类物质,醌发生聚合并与氨基酸发生反应,生成黑色素或褐色素,导致果蔬褐变、营养品质和商品性下降。醌类物质具有毒性,并通过共价调节与氨

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本文编号:1118101

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