嗜水气单胞菌ATCC7966 luxS基因缺失株构建及特性研究
本文关键词:嗜水气单胞菌ATCC7966 luxS基因缺失株构建及特性研究
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【摘要】:目的研究群体感应信号分子AI-2合成酶编码基因luxS对嗜水气单胞菌ATCC 7966生理特性及毒力因子的影响。方法利用同源重组原理,构建含有中间为卡那霉素抗性基因,两侧为luxS基因上、下游同源序列片段的基因敲除质粒,将构建好的质粒转化大肠埃希氏菌SM 10(λpir)感受态细胞,利用接合法将质粒转入嗜水气单胞菌ATCC 7966,通过抗性筛选、PCR和DNA测序确认嗜水气单胞菌luxS基因缺失突变株。比较野生株ATCC 7966和luxS基因缺失突变株生长速度、AI-2合成、胞外蛋白酶合成及生物膜形成的差异。结果嗜水气单胞菌luxS基因缺失突变株ΔluxS构建成功。与野生株相比,突变株生长周期延长,基本丧失合成AI-2和胞外蛋白酶的能力;突变株生物膜形成能力降低,生长24h时生物膜形成能力为野生株的14.5%,36h时生物膜形成能力为野生株的60.0%,突变株生物膜形成速度明显比野生株缓慢,结构更为疏松。结论 luxS基因参与调控嗜水气单胞菌的生长、AI-2合成和毒力因子表达,本研究为进一步研究luxS基因在嗜水气单胞菌致病性中发挥的作用奠定基础。
【作者单位】: 大连工业大学
【关键词】: 嗜水气单胞菌 luxS AI- 胞外蛋白酶 生物膜
【基金】:辽宁省教育厅项目(L2013508) 校基本科研业务费项目(DC201502020407)联合资助~~
【分类号】:S941.4
【正文快照】: (1.School of Biological Engineering,Dalian Polytechnic University,Dalian116034,China;2.College of Life Science,Dalian Nationalities University,State Ethnic Affairs Commission-Ministry ofEducation Key Laboratory of Biochemical Engineering,Dalian Nationali
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