葡萄糖苷酶的性质和功能研究及基因表达谱分析
本文关键词:斜卧青霉β-葡萄糖苷酶的性质和功能研究及基因表达谱分析,由笔耕文化传播整理发布。
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斜卧青霉β-葡萄糖苷酶的性质和功能研究及基因表达谱分析
论文目录
摘要第1-11页
ABSTRACT第11-16页
符号说明及縮略词第16-18页
第一章 绪论第18-42页
·β-葡萄糖苷酶第18-26页
·β-葡萄糖苷酶的分类第19页
·β-葡萄糖苷酶的结构第19-20页
·β-葡萄糖苷酶的催化机理第20-21页
·β-葡萄糖苷酶的底物特异性第21-22页
·β-葡萄糖苷酶的理化性质第22-23页
·β-葡萄糖苷酶在生物乙醇生产中的应用第23-26页
·丝状真菌木质纤维素酶的合成调控机制研究进展第26-34页
·碳源对纤维素酶的诱导作用第26-29页
·β-葡萄糖苷酶在真菌纤维素酶合成调控中的作用第29-31页
·木质纤维素酶的转录水平调控第31-33页
·其它因素对木质纤维素酶合成调控的影响第33-34页
·木质纤维素降解酶合成调控机制的转录组学研究第34-40页
·里氏木霉木质纤维素酶合成调控机制的研究进展第35-36页
·粗糙脉孢菌木质纤维素酶合成调控机制的研究进展第36-38页
·曲霉木质纤维素酶合成调控机制的研究进展第38-40页
·本论文的立题依据和研究内容第40-42页
第二章 胞外主要β-葡萄糖苷酶BGL1的性质及在木质纤维素酶合成调控中的功能研究第42-71页
引言第42-43页
·材料和方法第43-53页
·菌株、培养基和培养方法第43-44页
·常用储备液第44-45页
·常用试剂与仪器第45页
·基因组DNA与总RNA的提取第45-46页
·β-葡萄糖苷酶基因bgl1的克隆第46页
·胞外β-葡萄糖苷酶的聚丙烯葡聚糖凝胶层析第46页
·β-葡萄糖苷酶酶活力的测定第46-47页
·蛋白浓度的测定和SDS-PAGE分析第47页
·温度和pH对酶活力的影响第47页
·pBGL1的反应动力学分析第47-48页
·β-葡萄糖苷酶的添加对里氏木霉QM9414酶液糖化能力的影响第48页
·胞外主要β-葡萄糖苷酶BGL1缺失菌株Δbgl1的构建第48-50页
·敲除株的验证第50-51页
·Δbgl1的表型分析第51页
·胞外木质纤维素酶活力测定第51页
·纤维糊精的制备第51-52页
·Δbgl1中木质纤维素酶基因转录水平的测定第52-53页
·胞内纤维寡糖含量的测定第53页
·结果与讨论第53-69页
·斜卧青霉114-2 BGL1的氨基酸序列分析第53-54页
·斜卧青霉114-2 BGL1的分离纯化第54-56页
·pBGL1的酶学性质第56-58页
·β-葡萄糖苷酶的添加对里氏木霉QM9414发酵液糖化能力的影响第58-61页
·BGL1在斜卧青霉114-2中的敲除第61-62页
·Δbgl1的表型分析第62-63页
·BGL1的缺失对胞外蛋白分泌及木质纤维素酶活力的影响第63-65页
·BGL1的缺失对木质纤维素酶基因转录水平的影响第65-69页
小结第69-71页
第三章 胞内主要β-葡萄糖苷酶BGL2的性质及在木质纤维素酶合成调控中的功能研究第71-103页
引言第71-72页
·材料和方法第72-80页
·菌株和培养基第72页
·常用的储备液以及缓冲液第72页
·胞内β-葡萄糖苷酶基因缺失菌株的构建第72-75页
·bgl2的原位回补第75-76页
·蛋白浓度及木质纤维素酶活力的测定第76页
·Δbgl2纤维素酶基因转录水平测定第76页
·Δbgl2胞内纤维二糖浓度的测定第76页
·Δbgl1基因的克隆第76-77页
·Δbgl2表达载体的构建第77页
·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化第77-78页
·重组蛋白在E.coli BL21中的异源表达第78-79页
·重组蛋白的分离纯化第79页
·pH和温度对重组蛋白酶活力的影响第79页
·重组蛋白对纤维寡糖的水解作用第79-80页
·重组BGL2的转糖基作用检测第80页
·结果与讨论第80-101页
·斜卧青霉114-2胞内的β-葡萄糖苷酶第80-81页
·胞内β-葡萄糖苷酶在斜卧青霉114-2中的敲除第81-83页
·敲除株产纤维素酶能力的测定第83-85页
·BGL2的缺失对胞外蛋白和木质纤维素酶合成能力的影响第85-91页
·BGL2的缺失对纤维素条件下木质纤维素酶基因转录的影响第91-92页
·纤维二糖浓度对敲除株木质纤维素酶基因转录水平的影响第92-94页
·BGL2的氨基酸序列分析第94页
·BGL2在E.coli BL21中的异源表达第94-96页
·重组BGL2的分离纯化第96-97页
·重组BGL2的性质分析第97-101页
小结第101-103页
第四章 BGL1和BGL2双缺菌株中木质纤维素酶合成调控机制的研究第103-118页
引言第103-104页
·方法和材料第104-106页
·菌株、培养基和培养条件第104页
·BGL1和BGL2双敲除菌株Δbgl1Δbgl2的构建第104-105页
·Δbgl1Δbgl2的表型分析第105页
·Δbgl1Δbgl2的产酶能力测定第105页
·Δbgl1Δbgl2纤维素酶基因转录水平测定第105页
·Δbgl1Δbgl2胞内纤维二糖浓度的测定第105-106页
·结果与讨论第106-116页
·β-葡萄糖苷酶双敲除菌株△bgl1Δbgl2的构建第106-107页
·Δbgl1Δbgl2的表型分析第107-109页
·β-葡萄糖苷酶的缺失对木质纤维素酶活力的影响第109-111页
·β-葡萄糖苷酶的缺失对木质纤维素酶基因转录水平的影响第111-113页
·纤维二糖代谢相关基因的转录水平检测第113-114页
·不同二糖对斜卧青霉纤维素酶的诱导作用第114-115页
·斜卧青霉β-葡萄糖苷酶影响纤维素酶调控模型预测第115-116页
小结第116-118页
第五章 斜卧青霉114-2及高产突变株的基因表达谱差异分析第118-136页
引言第118-119页
·材料与方法第119-121页
·菌株、培养基及培养条件第119页
·常用溶液和试剂第119-120页
·RNA样品的准备及测序第120-121页
·差异表达基因的筛选第121页
·差异表达基因的分级聚类分析第121页
·差异表达基因的GO功能富集分析第121页
·结果与分析第121-134页
·斜卧青霉野生菌株114-2在不同条件下的转录差异分析第121-126页
·斜卧青霉突变株JU-A10-T在不同条件下的转录差异分析第126-130页
·野生菌株114-2与突变株JU-A10-T的转录差异分析第130-134页
小结第134-136页
论文创新性结果总结与展望第136-138页
参考文献第138-157页
攻读学位期间发表的学术论文第157-158页
致谢第158-159页
附录第159-173页
附件第173页
论文编号BS1903216,这篇论文共173页
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本文关键词:斜卧青霉β-葡萄糖苷酶的性质和功能研究及基因表达谱分析,由笔耕文化传播整理发布。
,本文编号:114207
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