循环型m icroRNA-92a在先天性巨结肠中的表达及上调CDX2基因的研究
本文关键词:循环型m icroRNA-92a在先天性巨结肠中的表达及上调CDX2基因的研究
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【摘要】:目的探讨循环型micro RNA-92a(mi R-92a)在先天性巨结肠(HD)中的表达,以及通过上调尾侧型同源转录因子-2(CDX2)基因抑制肠神经干细胞(ENSCs)增殖的可能机制。方法选取2013年1月-2015年12月在山东省临沂市沂水中心医院行先天性巨结肠根治术16例HD患儿的术前血清标本。实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)检测血清mi R-92a m RNA的表达。提取孕15 d胎鼠肠管ENSCs,通过免疫学方法鉴定ENSCs;免疫磁珠法分选Nestin+ENSCs,脂质体转染使Nestin+ENSCs内过表达mi R-92a,噻唑蓝法检测细胞的增殖活性,q RT-PCR、Western blot检测CDX2基因的表达。结果 HD患儿血清中mi R-92a m RNA的相对表达量为(23.5±4.66),高于对照组(t=12.661,P=0.000);ENSCs细胞培养早期Nestin染色阳性,具有向Tuj-1阳性、胶质纤维酸性蛋白阳性细胞分化的潜能;ENSCs过表达mi R-92a后,CDX2 m RNA的相对表达为(13.024±3.882),高于对照组(F=47.212,P=0.000),CDX2蛋白表达为(0.436±0.0828),高于对照组(F=48.793,P=0.000),细胞的增殖活性在转染后24、48和72 h明显受抑制。结论 mi R-92a通过上调CDX2基因的表达,抑制ENSCs的增殖,可能促进HD发生、发展。
【作者单位】: 山东省临沂市沂水中心医院小儿外科;山东省临沂市沂水中心医院检验科;
【分类号】:R726.5
【正文快照】: 先天性巨结肠(hirschsprung's disease,HD)是小儿外科常见的先天性消化道畸形[1]。有研究发现在胚胎发育过程中,肠神经干细胞(enteric neural stemcells,ENSCs)通过不断的迁移、增殖和分化,形成肠道的神经系统,当各种原因引起肠道神经系统的正常形成时,将导致肠道神经节细胞的
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