昆虫细胞表达基因ⅦNDVHN基因的免疫效力研究

发布时间：2017-11-18 14:35

  本文关键词：昆虫细胞表达基因ⅦNDVHN基因的免疫效力研究

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【摘要】：利用杆状病毒表达系统对ⅦNDV HN基因进行表达研究。RT-PCR扩增HN基因,将其克隆到p Fast Bac HT A载体中,阳性重组质粒转化DH10Bac感受态细胞,PCR鉴定获得阳性克隆,碱裂解法提取阳性质粒,转染Sf9昆虫细胞,获得含HN基因的重组杆状病毒质粒,重组病毒感染Sf9细胞72 h后,进行SDS-PAGE电泳、间接免疫荧光和Western-blot试验。免疫SPF鸡,间接ELISA测定抗体滴度,攻毒保护试验检测重组HN蛋白保护性。结果显示,目的蛋白HN在昆虫细胞中有特异性表达,该蛋白诱导了高滴度的NDV特异性抗体,具有良好的免疫原性;强毒攻击保护率达到75%,与La sota疫苗组保护率接近,均明显高于阴性对照组。上述结果为NDV新型亚单位疫苗奠定了基础。
【作者单位】： 徐州生物工程职业技术学院动物工程系;山东农业大学动物科技学院;
【基金】：徐州市科技项目(XM13B120) 山东省家禽产业体系岗位专家项目(SDAIT-13-011-04)共同资助
【分类号】：S852.65
【正文快照】： 新城疫是由新城疫病毒(Newcastle disease vi-rus,NDV)引起鸡/鸽或其他禽类的一种高度接触性传染病,是危害我国养禽业生产的最严重疾病之一[1-2]。随着预防接种的普及,典型ND的毁灭性大流行已基本被控制,但世界各地仍不断有ND的暴发或小规模流行,严重危弱毒疫苗最为常用,但由

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本文编号：1200148