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冬凌草AACT基因的克隆与表达分析

发布时间:2017-11-21 14:22

  本文关键词:冬凌草AACT基因的克隆与表达分析


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【摘要】:目的:克隆冬凌草乙酰辅酶A酰基转移酶(acetyl-CoA C-acetyltransferase,AACT)基因并分析其在冬凌草不同组织中的表达模式。方法:在冬凌草转录组测序的基础上设计特异引物,采用逆转录PCR技术克隆冬凌草IrAACT基因全长,并进行生物信息学分析,采用实时荧光定量PCR法分析其组织表达模式。结果:克隆得到的IrAACT基因全长1 254 bp,编码417个氨基酸,该序列与丹参等植物中的AACT基因有较高的同源性。生物信息学预测IrAACT具有Ⅱ型硫解酶催化作用的活性中心结构域。实时荧光定量PCR表明,IrAACT在冬凌草花和叶中的表达量明显高于根、茎和愈伤组织。结论:该研究获得了IrAACT基因的全长cDNA序列,并揭示了其在不同组织中的表达差异,为进一步阐述该基因在冬凌草二萜类成分合成途径中的功能奠定了基础。
【作者单位】: 河南中医学院药学院;北京中医药大学;
【基金】:国家自然科学基金(81173486) 河南中医学院创新人才项目(2011XCXRC02) 河南省高等学校青年骨干教师计划项目(2011GGJS-089)
【分类号】:S567
【正文快照】: 冬凌草为唇形科香茶菜属植物碎米桠Isodonrubescens(Hemsl.)H.Hara的地上部分,味甘、苦,性微寒,具有消炎止痛、清热解毒及抗肿瘤之功效〔1〕。冬凌草富含二萜类化合物,其中冬凌草甲素是从冬凌草叶中提取出的一种对映-贝壳杉烷二萜类化合物〔2〕。体外药效学研究显示,冬凌草甲

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