黄芩CHS基因的分子克

发布时间：2017-11-24 06:26

  本文关键词：黄芩CHS基因的分子克隆、序列分析及其高效表达载体的构建

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【摘要】：黄芩是一种传统的中药,黄芩苷是其重要的药用成分之一,具有广泛的药理作用并被用于多种疾病的治疗,具有巨大的药用价值和经济价值。CHS是催化黄芩苷合成限速步骤的关键酶,其表达量对黄芩苷的积累起关键的作用。本研究利用基因工程的手段,构建黄芩的CHS过表达载体,并将其导入根癌农杆菌中,拟在黄芩中持续表达CHS,促进黄芩苷合成。基于NCBI上公布的黄芩基因信息,设计特异引物,通过RT-PCR技术扩增CHS的c DNA全长序列,并利用生物信息学软件对序列进行分析,在引物两端引入特异酶切位点,将目的序列CHS通过限制性内切酶酶切和连接的方式,构建载体p BI 121-35S-CHS。通过PCR和酶切的方法进行验证,获得黄芩CHS基因的高效表达载体,可直接用于黄芩的遗传转化,使CHS基因表达量增加,促进黄芩苷的合成。
【作者单位】： 广东医学院附属医院;
【基金】：国家自然科学基金(81403044,81300035) 广东省自然基金(2014A030310064)共同资助
【分类号】：Q943.2;S567.239
【正文快照】： Molecular Clone,Sequence Analysis and Expression Vector Constructionwith High Efficiency of CHS Gene from Scutellaria baicalensis GeorgiLi Guoming Lei Wei Shui Xiaorong*The Affiliated Hospital,Guangdong Medical College,Zhanjiang,524001*Corresponding auth

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本文编号：1221333