逆转录病毒介导shRNA抑制Mig-7基因对人肝癌细胞血管生成拟态及体外侵袭转移的抑制作用

发布时间：2017-11-24 20:29

  本文关键词：逆转录病毒介导shRNA抑制Mig-7基因对人肝癌细胞血管生成拟态及体外侵袭转移的抑制作用

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【摘要】：目的探讨逆转录病毒介导的短发夹RNA(shRNA)干扰迁移诱导基因7(Mig-7)对肝细胞癌(HCC)细胞血管生成拟态(VM)形成及体外侵袭转移能力的影响。方法设计2条Mig-7 m RNA寡核苷酸序列(Mig-7 shRNA-1,Mig-7 shRNA-2)和1条作为负对照的无关序列(Mig-7 shRNA-N)。构建Mig-7shRNA逆转录病毒表达载体质粒,并将要接受转染的人肝癌细胞MHCC-97H分为6组:转染Mig-7 shRNA-1组;转染Mig-7 shRNA-2组;转染Mig-7 shRNA-N组;转染空载质粒组(Vector);重组人血管内皮抑素(ES,商品名:恩度)组;MHCC-97H细胞对照组(Control)。半定量PCR、Western blot检测其对Mig-7表达的影响;三维细胞培养观察其对VM形成的影响;细胞间粘附实验、Transwell侵袭实验及迁移实验观察其对细胞粘附、侵袭及迁移能力的影响。结果转染后,Mig-7 shRNA-1组与Mig-7 shRNA-2组中Mig-7 m RNA与蛋白的表达、MHCC-97H细胞形成VM能力、细胞侵袭、迁移能力明显减低(P0.05),细胞间粘附能力明显增加(P0.05);Mig-7 shRNA-N组、Vector组、ES组中MHCC-97H细胞Mig-7的表达、VM形成、细胞间粘附、迁移、侵袭能力较MHCC-97H细胞组均无明显变化。结论逆转录病毒介导的shRNA能够有效下调Mig-7的表达并明显抑制HCC细胞VM形成能力及侵袭转移能力,增加细胞间的粘附作用;ES对HCC细胞的Mig-7表达、VM形成、侵袭转移及粘附能力无明显影响。
【作者单位】： 武警后勤学院附属医院肿瘤外科;西安交通大学医学院第一附属医院肝胆外科;锦州医科大学武警后勤学院附属医院培养基地;武警后勤学院附属医院救援研究所;
【基金】：国家自然科学基金(81272547)~~
【分类号】：R735.7
【正文快照】： Inhibitory effect of Mig-7 silencing by retrovirus-mediated sh RNA on vasculogenicmimicry,invasion and metastasis of human hepatocellular carcinoma cells in vitroQU Bo1,2,SHENG Guannan3,YU Fei3,CHEN Guannan3,LV Qi4,MAO Zhongpeng1,GUO Long2,LV Yi21Departm

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