野生型rLj-RGD3基因重组突变体rLj-112分子克隆及对HeLa细胞活性影响

发布时间：2017-11-27 08:14

  本文关键词：野生型rLj-RGD3基因重组突变体rLj-112分子克隆及对HeLa细胞活性影响

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【摘要】：为研究突变体r Lj-112蛋白的抗肿瘤活性,人工合成七鳃鳗野生型r Lj-RGD3蛋白和突变型r Lj-112蛋白,通过比较两种蛋白质的抗增殖、迁移和促凋亡的活性,确定突变体r Lj-112蛋白的生物学意义及地位。采用MTT方法检测不同浓度的r Lj-112蛋白对He La细胞增殖的抑制作用。结果表明,r Lj-112蛋白能显著抑制He La细胞的增殖,且IC50为4.3μmol/L。使用Transwell细胞培养板对b FGF诱导的He La细胞迁移实验表明,r Lj-112蛋白能抑制He La细胞的迁移。r Lj-112蛋白作用后,He La细胞经Hoechst33258和Annexin V-FITC染色结果显示,细胞均凋亡。流式细胞仪进一步证明,r Lj-112蛋白能诱导He La细胞发生凋亡,且呈剂量依赖性。由此可见,与野生型r Lj-RGD3蛋白比较,突变型r Lj-112蛋白有较高的细胞毒性作用,具有抗肿瘤的功能,有望应用于抗肿瘤基因工程药物的开发,具有重要的生物学意义。
【作者单位】： 辽宁师范大学生命科学学院;沈阳军区总医院急诊医学部全军重症(战)创伤救治中心实验室;牡丹江医学院附属二院消化内科;
【基金】：国家高技术研究发展计划(863计划,No.2014AA093502) 国家自然科学基金(No.30770297) 国家海洋公益项目(No.201305016-5) 大连市科技攻关项目(No.2014E12SF067)~~
【分类号】：R73-3;Q78
【正文快照】： *联系人Tel:010-85827097;E-mail:jihongwang999@hotmail.com**并列第一作者Received:July 24,2015;Accepted:November 8,2015Supported by National High Technology Research and Development Program of China(863 Program,No.2014AA093502),National Natural ScienceFound

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本文编号：1231180