金铁锁鲨烯环氧酶基因的克隆与表达

发布时间：2017-11-29 01:21

  本文关键词：金铁锁鲨烯环氧酶基因的克隆与表达

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【摘要】：目的:从金铁锁Psammosilene tunicoides W.C.Wu et C.Y.Wu中克隆三萜皂苷合成途径中的关键酶鲨烯环氧酶(squalene epoxidase,SE)基因,并进行生物信息学和表达分析。方法:在转录组数据分析的基础上,利用RTPCR方法获得金铁锁SE基因的两个克隆的全长c DNA序列及进行生物信息学分析;并进行Real-time PCR实验,测定SE在不同组织中的表达量。结果:得到2条SE c DNA,SE-1全长1 642 bp,开放阅读框1 578 bp,编码525个氨基酸;SE-2全长1 552 bp,开放阅读框1 446 bp,编码481个氨基酸;构建了p EASY-E1-SE-1及p EASY-E1-SE-2重组质粒,获得稳定的原核表达体系,SDS-PAGE结果表明所表达的蛋白与预测的蛋白大小一致。Real-time PCR结果表明SE-1、SE-2基因在根中的表达量均高于茎和叶。结论:从金铁锁中成功克隆了SE基因,可为进一步研究金铁锁中三萜皂苷合成代谢途径及其关建酶表达模式奠定基础。
【作者单位】： 云南中医学院;
【分类号】：282.71
【正文快照】： 稀有濒危物种金铁锁Psammosilene tunicoidesW.C.Wu et C.Y.Wu为石竹科单型属植物〔1〕,以根入药,是“云南白药”的主要组成药之一,主治跌打损伤、风湿痛、痈疽疮疖、创伤出血等症〔2〕,主要有效成分为金铁锁三萜总皂苷〔3〕。MVA途径是植物体内皂苷合成的主要途径,在其生物合

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本文编号：1235699