猪流行性腹泻病毒的分离鉴定及N基因序列分析

发布时间：2017-12-02 00:03

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【摘要】：【目的】了解引起仔猪腹泻的猪流行性腹泻病毒是否为变异株。【方法】从疑似猪流行性腹泻病毒感染的猪场采集死亡仔猪的肠黏膜及其内容物,将病料常规处理后接种VERO细胞,采用维持培养液加10μg/mL的胰酶的方法分离培养。用RT-PCR、间接免疫荧光、动物回归实验以及部分序列分析等方法对分离株进行鉴定。【结果】病料在接入细胞第一代即出现病变,细胞肿胀变圆,形成合胞体,逐渐脱落,细胞病变明显。随着病毒传代次数的增加,细胞病变逐渐稳定,进行RT-PCR检测、间接免疫荧光检测以及动物回归实验,最终确定分离株符合PEDV特征,并命名为BJ2015,测定毒株的TCID50为10-6.4/0.1mL。基因测序结果显示,N基因长1 329bp,编码442个氨基酸。与参考株N基因核苷酸序列比对及遗传进化分析表明,BJ2015与传统株CV777亲缘关系较远;与流行变异株BJ-2011-1N基因在进化树的同一个分支上,二者的核苷酸和氨基酸同源性分别为99.6%、99.5%,表明BJ2015与BJ-2011-1亲缘关系较近。【结论】结果表明BJ2015为PEDV流行性变异毒株。
【作者单位】： 兽医学(中医药)北京市重点实验室/北京农学院动物科学技术学院;
【基金】：“十二五”国家科技支撑计划项目重点课题“畜禽呼吸;消化系统常见病证中兽药创制及应用示范(2011BAD34B01)” 2016北京市农委课题“功能复合型微生态添加剂示范与推广(PXM2016-014207-000057)”
【分类号】：S852.651
【正文快照】： 猪流行性腹泻(Porcine epidemic diarrhea,PED)是由冠状病毒属猪流行性腹泻病毒(Porcine epi-demic diarrhea Virus,PEDV)引起的一种猪的肠道传染病,主要表现为猪的腹泻、呕吐、脱水及高发病率和高致死率,不同年龄段、不同性别以及不同品系的猪均能感染PEDV,尤其以哺乳仔猪的

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2 王长远;周启扉;薛军;王继昌;闻晓波;;鸡传染性支气管炎病毒N基因的克隆及序列分析[J];黑龙江八一农垦大学学报;2008年03期

3 黄小波;曹三杰;文心田;肖国生;肖驰;;猪传染性胃肠炎病毒N基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达[J];中国兽医学报;2008年05期

4 王希军;胡北侠;黄艳艳;李建亮;姜宁朋;张秀美;;鸡肾型传染性支气管炎病毒的分离及其N基因序列分析[J];西南农业学报;2010年03期

5 孙冰;李彬;何孔旺;郭容利;倪艳秀;俞正玉;姜平;;猪流行性腹泻病毒变异株N基因的克隆及原核表达[J];畜牧与兽医;2014年05期

6 熊成龙;邵中军;郑刚;居丽雯;周联娣;姜庆五;;河南省9株狂犬病毒的N基因序列分析[J];复旦学报(医学版);2010年03期

7 刘华南;曹伟军;杨帆;张艳;杨华;王松豪;郑海学;;猪流行性腹泻病毒N基因的原核表达与鉴定[J];中国兽医科学;2013年11期

8 杨巍;李广兴;孟凡丹;王鑫;任晓峰;;猪流行性腹泻病毒N基因的克隆及原核表达[J];东北农业大学学报;2011年06期

9 李广兴,马德星;鸡传染性支气管炎病毒SC株N基因序列测定与同源性分析[J];吉林畜牧兽医;2004年07期

10 吴玉璐;朱建平;杨莘;王亚欣;徐彦召;虞凌雪;于海;刘光清;童光志;周艳君;;猪流行性腹泻病毒N基因的表达及抗原性分析[J];中国预防兽医学报;2013年04期

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1 曾瑜虹;王红宁;李玉玲;阳泰;汪雪;张鹏举;;携带禽传染性支气管炎病毒N基因减毒沙门菌活载体疫苗的构建[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十四次学术研讨会论文集[C];2008年

2 杨恒;曹三杰;黄小波;文心田;;猪传染性胃肠炎病毒S、N基因核酸疫苗的构建与免疫原性研究[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会论文集（下册）[C];2009年

3 周生;王红宁;李春;柳萍;;禽传染性支气管炎病毒中国四川株N基因的克隆与序列分析[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十一次学术研讨会论文集[C];2002年

4 江国托;高房昌;崔丽;兰措姐;张海波;康丽娟;王丽云;陈瑶;李文彬;易军;王向阳;;鸡新城疫病毒感染性核酸免疫抗原、抗体和N基因的检测[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立20周年庆典暨第十次学术研讨会论文集（下）[C];2003年

5 王劭;陈少莺;朱小丽;程晓霞;江斌;林锋强;陈仕龙;;猪传染性胃肠炎病毒N基因的克隆及原核表达[A];2008年福建省科协第八届学术年会农业分会场论文集[C];2008年

6 王红宁;周生;黄勇;柳萍;陈萍;李晓英;唐梦君;潘盛;白天;;禽传染性支气管炎病毒S1、M、N基因真核表达质粒的构建及免疫原性研究[A];第六届全国会员代表大学暨第11次学术研讨会论文集（下）[C];2005年

7 王红宁;周生;黄勇;柳萍;陈萍;李晓英;唐梦君;潘盛;白天;;禽传染性支气管炎病毒S1、M、N基因真核表达质粒的构建及免疫原性研究[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会论文集[C];2005年

8 秦卓明;徐怀英;曲新泽;王友令;黄兵;李玉峰;;传染性支气管炎病毒S1基因和N基因的遗传变异及其基因分型的比较[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十五次学术研讨会论文集[C];2010年

9 亓丽红;艾武;黄兵;王莉莉;秦卓明;宋敏训;;鸡传染性支气管炎病毒S1,M和N基因遗传变异相关性[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十五次学术研讨会论文集[C];2010年

10 李广兴;马德星;;鸡传染性支气管炎病毒5株国内分离株N基因变异分析[A];中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十三次学术讨论会和中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十二次学术讨论会论文集[C];2005年

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1 黄小波;猪传染性胃肠炎检测基因芯片与猪传染性胃肠炎病毒SC-H株N基因表达研究[D];四川农业大学;2006年

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2 杜恩岐;鸡传染性支气管炎病毒国内分离株LX4 5a、5b及N基因的研究[D];西北农林科技大学;2003年

3 时莉;四省区鸡传染性支气管炎病毒M、N基因分子流行病学研究[D];新疆农业大学;2009年

4 曲新泽;传染性支气管炎病毒的基因分型及S1基因和N基因遗传多样性分析[D];山东农业大学;2010年

5 唐丽杰;猪传染性胃肠炎病毒TH-98株N基因在大肠杆菌中的表达及重组N蛋白的纯化[D];东北农业大学;2002年

6 何鑫;猪流行性腹泻病毒的分离鉴定及其S基因和N基因的序列分析[D];四川农业大学;2012年

7 路希山;2006-2008年山东鸡传染性支气管炎病毒分离株S1与N基因的分子特征[D];青岛农业大学;2009年

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