DOTAP脂质体介导VEGF基因转染人脂肪干细胞及目的基因的表达

发布时间：2017-12-03 18:19

  本文关键词：DOTAP脂质体介导VEGF基因转染人脂肪干细胞及目的基因的表达

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【摘要】：目的:研究脂质体介导的血管内皮生长因子(VEGF)基因转染人脂肪干细胞(hASCs)及VEGF的表达。方法:胶原酶消化吸脂术脂肪,收获细胞沉淀,培养至第4代时利用流式细胞术检测细胞表型,并诱导其成脂成骨分化,鉴定为hASCs。转染组利用DOTAP脂质体将pIRES2-EGFP-VEGF质粒转入hASCs,对照组为脂质体空载。免疫荧光染色检测hASCs内VEGF的表达,ELISA检测上清液中VEGF浓度的变化。结果:1ml吸脂术脂肪可得到(4.38±0.21)×10~5个细胞,第4代时hASCs高表达CD90(81.49%),低表达CD19(6.37%)、CD31(14.91%)、CD34(17.56%)和CD45(15.39%),诱导分化后油红O和茜素红染色均呈阳性。分光光度计显示质粒DNA浓度为595ng/μl。转染组hASCs表达GFP和VEGF,转染效率为(43.69±18.53)%;对照组不表达GFP,但表达较低的VEGF。转染组VEGF的光密度是对照组的2.13倍,其上清液中的VEGF浓度随时间显著上升,与对照组相比差异有统计学意义(P0.05)。结论:DOTAP脂质体可成功将pIRES2-EGFP-VEGF质粒转入hASCs,转染后的VEGF表达和分泌水平显著提高。
【作者单位】： 美国德克萨斯大学MD安德森肿瘤中心整形外科;解放军总医院整形修复科;美国贝勒医学院医学系肾脏学部;北京美莱美容整形医院口腔美容中心;
【基金】：国家自然科学基金面上项目(No:81272123,No:81571864)
【分类号】：R622
【正文快照】： 脂肪移植是近年来整形美容专业的热点,脂肪组织分布广泛,通过吸脂术获取简便,损伤小,患者接受度高。解放军总医院整形修复科利用脂肪移植进行除皱、隆胸、丰臀等美容充填,或修复难愈创面,重建肿瘤或外伤导致的各种软组织缺损等。但是脂肪移植早期血管化程度低,大量移植常因缺

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前4条

1 陈犹白;陈聪慧;Qixu Zhang;韩岩;;脂肪干细胞成脂分化的研究进展[J];中国美容医学;2016年04期

2 陈犹白;陈聪慧;Qixu Zhang;韩岩;;脂肪干细胞成骨分化的研究进展[J];中华损伤与修复杂志(电子版);2016年02期

3 陈犹白;陈聪慧;Qixu Zhang;韩岩;;脂肪干细胞表型和标记物的研究进展[J];中国美容医学;2016年03期

4 陈犹白;陈聪慧;Qixu Zhang;韩岩;;脂肪干细胞分离、纯化和保存:研究进展与未来方向[J];中国组织工程研究;2016年10期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 陈犹白;张启旭;Butler C E;吴叶文;张丽萍;董江陵;陈聪慧;韩岩;;DOTAP脂质体介导VEGF基因转染人脂肪干细胞及目的基因的表达[J];临床耳鼻咽喉头颈外科杂志;2016年12期

2 陈犹白;陈聪慧;Qixu Zhang;韩岩;;脂肪干细胞成骨分化的研究进展[J];中华损伤与修复杂志(电子版);2016年02期

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 陈犹白;陈聪慧;Qixu Zhang;韩岩;;脂肪干细胞表型和标记物的研究进展[J];中国美容医学;2016年03期

2 刘家寅;刘光源;田发明;张柳;刘会仁;胡克俭;;辛伐他汀通过p38MAPK信号通路诱导BMSCs成骨分化的研究[J];中国骨质疏松杂志;2016年02期

3 刘玉平;刘涛;王明明;李明;俞光荣;;人髌下脂肪垫来源脂肪间充质干细胞的分离、培养及鉴定[J];中国组织工程研究;2015年41期

4 汪亮;刘耀升;刘蜀彬;;糖皮质激素诱导股骨头坏死发病机制的研究进展[J];中华损伤与修复杂志(电子版);2015年05期

5 张庆富;高学坡;;促炎性白细胞介素在烧伤炎症反应中的作用[J];中华损伤与修复杂志(电子版);2015年05期

6 张园园;刘真;贾赤宇;;脂肪干细胞在促进移植皮瓣血管化中的研究进展[J];中华损伤与修复杂志(电子版);2015年05期

7 潘玮敏;刘民;杨建昌;段春光;黄悦;;LIM矿化蛋白1/低氧诱导因子1α慢病毒载体转染脂肪源性干细胞的成骨分化[J];中国组织工程研究;2015年32期

8 肖建红;张阳春;张常然;杨兴;;人皮下脂肪干细胞的成骨、成脂分化诱导及鉴定[J];中国组织工程研究;2015年32期

9 刘子琪;孙同文;万有栋;姚瑞;阚全程;;脂肪源性干细胞体外分离培养及向内皮祖细胞的诱导分化[J];中国组织工程研究;2015年32期

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【相似文献】

中国期刊全文数据库 前6条

1 王盛;陈忠;唐小斌;吴章敏;吴庆华;;VEGF基因转染血管内皮祖细胞的实验研究[J];中国普通外科杂志;2008年08期

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中国博士学位论文全文数据库 前2条

1 赵丽荣;超声联合超声造影剂促进VEGF基因转染的体内、外研究[D];吉林大学;2006年

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中国硕士学位论文全文数据库 前3条

1 张辉;重组合异种骨复合VEGF基因转染骨髓间充质干细胞对兔非创伤性股骨头坏死修复的实验研究[D];兰州大学;2008年

2 李R，

本文编号：1249602