元宝枫叶片花色苷相关基因克隆与序列分析
本文关键词:元宝枫叶片花色苷相关基因克隆与序列分析
【摘要】:元宝枫(Acer truncatum)是槭树科(Aceraceae)槭树属(Acer)的多年生落叶乔木,具有丰富多彩的独特叶色,是一种重要的观叶植物。其翅果扁平,形状像中国古代金锭“元宝”而得名。单叶对生,掌状五裂(少数3裂),在春季嫩枝嫩叶多为红色,入秋后叶片又变成红色或黄色,色彩艳丽,观赏价值极佳,在园林绿化中被广泛应用,如今备受关注。目前人们对元宝枫叶色形成的分子机理的研究相当缺乏,未见任何关于元宝枫叶色形成相关基因的克隆和序列分析的报道。这极大的限制了以元宝枫为代表的彩叶植物的分子育种和叶色基因工程的开展。花色素苷对彩叶植物叶色多彩的形成起主要作用,本研究从元宝枫的红叶新品系1-6号的叶片中克隆了花色素苷生物合成的几个相关基因,并对基因序列进行分析,以便探讨对元宝枫叶片花色素苷生物合成途径的分子调控机理,主要结果如下:1、为获取高质量的元宝枫叶片总RNA,通过比较分析发现改良CTAB法更适于元宝枫叶片总RNA的提取。2、采用RT-PCR和RACE-PCR的方法,从元宝枫叶片中首次成功克隆了调控花色素苷表达的转录因子WD40基因的全长cDNA序列,该基因全长1356bp,编码337个氨基酸。在NCBI中BLAST,发现获得的WD40基因的核苷酸序列和推导的氨基酸序列导‘其他物种的结构基因有较高的同源性,与血红鸡爪槭WD40相似性很高,并且推断该基因为元宝枫的WD40转录因子。该基因名为AtrWD40,在Genbank已注册,登录号为KX289886。3、采用RT-PCR方法,从元宝枫叶片中首次克隆了查尔酮合成酶基因CHS的全长cDNA序列,该基因全长1365 bp,编码365个氨基酸,具有CHS基因的典型结构特征。NCBI中BLAST分析表明,CHS基因编码蛋白序列与许多已注册的植物CHS蛋白具有很高的相似性,所获得的核苷酸序列和推导的氨基酸序列与其他物种的结构基因CHS有较高的同源性,所得片段包含结构域CHS-Like(cd00831),推断该基因为元宝枫的CHS结构基因。该基因名为AtrCHS,在Genbank已注册,登录号为KU871063。4、以cDNA为模版,从元宝枫叶片中克隆了F3H基因片段,该基因长度为587bp,编码195个氨基酸。
【学位授予单位】:山东农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:S687
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,本文编号:1266525
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