新Cry1B蛋白基因的筛选与鉴定
发布时间:2017-12-14 19:35
本文关键词:新Cry1B蛋白基因的筛选与鉴定
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【摘要】:[目的]Cry1B类杀虫蛋白对鳞翅目和鞘翅目昆虫具有较好的杀虫活性,具有广阔的应用前景。为进一步挖掘并研究Cry1B类蛋白。[方法]本文使用一对引物对24个Bt菌株进行定性PCR反应,尝试筛选新的cry1B基因。该引物能够扩增包括Cry1B蛋白N-端3个结构域在内的718个氨基酸编码序列。[结果]共有8个菌株包含cry1B基因,约占筛选菌株的33.3%。序列分析发现,获得8个基因中有6个为新基因,其中6-1和15-1基因编码氨基酸序列与Cry1Bd1完全相同;9-1、10-1、18-1、20-1和21-1对应氨基酸序列与Cry1Bd1的一致性≥98.5%;而4-1基因编码的氨基酸序列与Cry1Bb1和Cry1Bc1蛋白N-端仅差1个氨基酸,需要进一步鉴定C-端长尾的编码序列以判断其所属亚类。[结论]本研究获得6种新型Cry1B蛋白基因,为进一步解析这类蛋白的杀虫活性和机理提供了丰富的材料。
【作者单位】: 山西农业大学生命科学学院;山西农业大学农业生物工程研究所;
【基金】:国家自然科学基金项目(31601690) 山西省基础研究项目自然科学基金面上项目(2015011080) 山西农业大学科技创新基金(2014015)
【分类号】:S476
【正文快照】: 目前,苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringien-sis,Bt)表达的晶体杀虫蛋白依然是转基因抗虫作物的主要功能蛋白。其中,Cry1B类对鳞翅目的欧洲玉米螟(Ostrinia nubilalis)、亚洲玉米螟(Os-trinia furnacalis)、小菜蛾(Plutella xylostella)、马铃薯块茎蛾(Phthorimaea operculella
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,本文编号:1289116
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