发状念珠藻醛酮还原酶基因NfAKR的克隆与表达

发布时间：2017-12-17 04:34

  本文关键词：发状念珠藻醛酮还原酶基因NfAKR的克隆与表达

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【摘要】：以发状念珠藻细胞为试材,采用PCR技术克隆了醛酮还原酶基因的开放阅读框(ORF)序列,命名为NfAKR。对基因序列特征进行了生物信息学分析,根据其编码氨基酸序列预测了NfAKR蛋白的三维结构,同时探讨了PEG-6000胁迫下NfAKR的表达特性。结果表明:NfAKR基因的编码序列长912bp,编码304个氨基酸,预测其编码蛋白的相对分子量为33.51kD,理论等电点为4.94,具有醛酮还原酶超家族保守结构域。NfAKR蛋白主要由10个α-螺旋和11β-折叠组成,中间形成一个疏水穴,作为酶的催化活性中心。NfAKR与点形念珠藻处在同一进化枝上,具有较近的亲缘关系。qRT-PCR分析显示,PEG-6000胁迫下NfAKR基因上调表达,当PEG-6000浓度为8%时,其相对表达量为5.66并达到峰值。依据NfAKR基因响应干旱胁迫上调表达的特性,推测醛酮还原酶可能参与发状念珠藻抵御干旱胁迫过程。
【作者单位】： 宁夏大学生命科学学院西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室;拉萨市第一中等职业技术学校;
【基金】：国家自然科学基金(31360025,31360361,31360054) 宁夏大学研究生创新项目(GIP201611)
【分类号】：Q943.2
【正文快照】： 干旱是影响植物生长最主要的非生物胁迫之一,给植物的生长和产量等带来诸多不利的影响。干旱、盐和低温等非生物逆境会诱导超氧离子、过氧离子、羟自由基等活性氧的积累,导致细胞中膜脂不饱和脂肪酸的过氧化水平增高,破坏膜结构及膜的生理完整性,对植物产生伤害[1-2]。但它们

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本文编号：1298789