色氨酸酶重组基因表达及其酶法合成L-色氨酸
本文关键词:色氨酸酶重组基因表达及其酶法合成L-色氨酸
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【摘要】:为实现色氨酸酶高效、低成本催化合成L-色氨酸,利用p ET30a为载体在宿主细胞E.coli BL21(DE3)中重组表达了产气肠杆菌(Enterobacter aerogenes)来源的色氨酸酶,以丙酮酸、吲哚和氨为底物,探究其酶学性质,考察了反应温度、起始p H、底物摩尔比对酶促反应的影响,并利用丙酮酸发酵液为底物酶法合成L-色氨酸。结果表明,色氨酸酶重组表达成功,色氨酸酶最佳反应条件为:温度35℃,起始p H=9.0,底物摩尔比n(吲哚)∶n(丙酮酸)=0.6∶1,底物丙酮酸浓度为0.17 mol/L。利用重组色氨酸酶全细胞催化100 m L浓度为0.57 mol/L丙酮酸发酵液,流加浓度为4.27 mol/L吲哚酒精溶液6.5 m L,反应28 h后,L-色氨酸浓度达0.25 mol/L,吲哚摩尔转化率达91.8%。
【作者单位】: 医药生物技术国家重点实验室南京大学生命科学学院;南京医科大学药学院;
【基金】:国家自然科学基金青年科学基金项目(21302100)~~
【分类号】:Q78;O629.71
【正文快照】: 210029)Foundation item:Supported by the National Natural Science Foundation of China(21302100)L-色氨酸(L-tryptophan,C11H12N2O2)是人体内8种必需氨基酸之一,在人和动物生长发育及新陈代谢中起着重要作用,广泛用于医药、食品、化妆品和饲料等领域[1]。L-色氨酸能透过
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,本文编号:1300475
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