半滑舌鳎Shh基因的克隆与表达及甲基化分析

发布时间：2017-12-18 04:28

  本文关键词：半滑舌鳎Shh基因的克隆与表达及甲基化分析

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【摘要】：通过RACE方法获得半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)Hh基因家族的Shh基因,该基因全长1 922 bp,其中5′UTR 266 bp,3′UTR 360 bp,ORF1 296 bp,编码431个氨基酸,经预测该多肽的相对分子质量为47.28 k D,理论等电点6.95,具有Hh基因家族特有的保守结构域。氨基酸序列分析表明,半滑舌鳎Shh与牙鲆的同源性最高,为82%,与其他鱼类同源性为74%~81%,与非洲爪蟾的同源性为61%,与人和鼠的同源性为63%~64%。甲基化结果显示,Shh基因在1龄卵巢中的甲基化程度普遍低于雄鱼与伪雄鱼精巢。基因表达分析显示,Shh基因在胚胎期的囊胚期表达显著高于其它时期(P0.05),在雌雄成鱼8个组织器官均表达,在雌性性腺分化的关键期孵化后50 d,雌性性腺中表达量较前期升高,且显著高于同时期雄性性腺中的表达(P0.05),在雄性性腺分化的关键期80~95 d,Shh基因在雄性中的表达水平显著升高(P0.05),在8月龄、1龄及2龄雌鱼性腺中表达显著高于雄鱼与伪雄鱼。本研究表明,半滑舌鳎Shh基因在进化中高度保守,与胚胎分化、组织器官形成、雌雄性腺分化及性腺发育密切相关。
【作者单位】： 中国海洋大学水产学院;中国水产科学研究院黄海水产研究所;中国水产科学研究院鲟鱼繁育工程技术研究中心;
【基金】：国家自然科学基金项目(31130057;31472269) 国家863高技术研究发展计划(2012AA10A403-2) 山东泰山学者工程专项
【分类号】：S917.4
【正文快照】： Hedgehog(Hh)是编码一系列分泌蛋白的基因家族,它控制着细胞的生长,代谢,参与各种无脊椎动物和脊椎动物的胚胎发育以及控制各种机体器官的发生发育,在多细胞生物生命活动中扮演重要角色[1]。Hedgehog基因最早是从无脊椎动物果蝇(Drosophila melanogaster)中克隆得到,通过研究，

本文编号：1302836