长江江豚TRAIL基因的克

发布时间：2017-12-18 22:00

  本文关键词：长江江豚TRAIL基因的克隆、体外表达及生物学功能分析

  更多相关文章： TRAIL 江豚 细胞凋亡 Jurkat细胞 HeLa细胞

【摘要】：构建可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)基因的表达体系,研究其蛋白表达产物对肿瘤细胞凋亡的影响,为以后江豚免疫系统的研究奠定基础。通过RT-PCR技术从江豚Neophocaena phoconoides血液总RNA中反转录扩增出肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(简称fTRAIL)的全长cDNA序列,并将fTRAIL的胞外可溶性(简称fsTRAIL)片段连接入表达载体pET43.1a中,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达并纯化,Western blotting对产物Nus-His-fsTRAIL蛋白进行鉴定。体外用MTT法、台盼蓝拒染法及流式细胞术检测Nus-His-fs TRAIL蛋白对Jurkat细胞和HeLa细胞的影响。成功构建了fTRAIL胞外可溶性片段(简称fsTRAIL)与pET43.1a组成的表达载体,并获得Nus-His-fsTRAIL蛋白。体外实验表明,Nus-His-fsTRAIL蛋白能够以剂量依赖的方式抑制Jurkat和HeLa细胞的增殖并诱导其凋亡。Nus-His-fsTRAIL表达产物具有对Jurkat和HeLa细胞体外抗肿瘤活性的作用。
【作者单位】： 南京师范大学生命科学学院江苏省分子医学重点实验室;南京医科大学康达学院;
【基金】：国家自然科学基金(No.31370401)资助~~
【分类号】：Q78
【正文快照】： Received:October 10,2015;Accepted:March 14,2016Supported by:National Natural Science Foundation of China(No.31370401).Corresponding author:Wenhua Ren.Tel/Fax:86-25-85891163;E-mail:spidervenom@163.com裴丽丽,章纬菁,卢佳,等.长江江豚TRAIL基因的克隆、体外表达

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前6条

1 金天明;郑世民;;表达鸡TRAIL基因的重组5型腺病毒构建[J];中国预防兽医学报;2009年07期

2 杨文理;陈毅荣;陈守春;;人TRAIL基因胞外段的化学合成和克隆[J];四川大学学报(自然科学版);2009年02期

3 杨芳;李鸿钧;李亮助;易山;施锐;孙茂盛;;腺病毒介导TRAIL基因治疗裸鼠皮下肺癌细胞移植瘤[J];云南大学学报(自然科学版);2007年S3期

4 居中华,苗怡,戴冰冰,钱关祥,陈诗书;分泌型重组TRAIL基因真核表达载体的构建及其凋亡效应[J];细胞与分子免疫学杂志;2001年06期

5 林琳,何志勇,杨冠珍,谢联辉,吴松刚,吴祥甫;人胎盘TRAIL基因的克隆和在大肠杆菌中的表达[J];药物生物技术;2002年01期

6 ;[J];;年期

中国重要会议论文全文数据库 前6条

1 马宏;郑德先;刘彦信;;口服AAV介导的TRAIL基因在肝癌治疗中的应用[A];科技、工程与经济社会协调发展——中国科协第五届青年学术年会论文集[C];2004年

2 沈周俊;陈善闻;周卸来;;TRAIL基因重组卡介苗的构建及对膀胱肿瘤杀伤作用的研究[A];第十五届全国泌尿外科学术会议论文集[C];2008年

3 马宏;郑德先;刘彦信;;口服AAV介导的TRAIL基因在肝癌治疗中的应用[A];中国生物工程学会第四次会员代表大会暨学术讨论会论文摘要集[C];2005年

4 朱洪波;陈琳琳;何超;毛伟芳;宋章法;黄学锋;王达;方炳良;;结肠癌DLD1细胞获得性TRAIL基因耐药的机制研究[A];2005年浙江省肿瘤外科学术会议论文汇编[C];2005年

5 李学刚;关广聚;付玉芹;柳刚;吕学爱;孙云;吴涛;孙巧玲;;TRAIL基因表达在糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡中的作用[A];“中华医学会肾脏病学分会2004年年会”暨“第二届全国中青年肾脏病学术会议”论文汇编[C];2004年

6 谢丛华;曹传华;秦琴;周福祥;钟亚华;梁辰;周云峰;;Egr-1启动子调控TRAIL基因表达对人结肠癌细胞株SW480的抑制作用[A];2007第六届全国放射肿瘤学学术年会论文集[C];2007年

中国博士学位论文全文数据库 前5条

1 陈善闻;TRAIL基因重组卡介苗的构建及对膀胱肿瘤杀伤作用的研究[D];浙江大学;2007年

2 周玮;溶瘤病毒介导的TRAIL基因治疗恶性肿瘤的研究[D];浙江大学;2011年

3 范清林;人TRAIL基因的克隆、表达纯化及对人A549细胞的抗肿瘤作用及其部分机制[D];安徽医科大学;2004年

4 刁建东;hTERT启动子调控的TRAIL基因诱导乳腺癌细胞凋亡作用的研究[D];吉林大学;2009年

5 王毅刚;携带TRAIL基因的肿瘤靶向性腺相关病毒载体构建及其对肝癌的抑制效应[D];华东理工大学;2010年

中国硕士学位论文全文数据库 前5条

1 于明燕;TRAIL基因多态性与2型糖尿病的相关性研究[D];山东大学;2008年

2 劳伟峰;TRAIL基因对肝癌细胞SMMC7721的促凋亡作用及其旁观者效应[D];浙江大学;2002年

3 梁建华;TRAIL基因联合阿霉素对大肠癌细胞株RKO作用的研究及阿霉素心脏毒性1例报告[D];浙江大学;2003年

4 陈剑秋;重组TRAIL基因真核表达载体的构建、表达及其诱导喉癌细胞株Hepa2凋亡的效应[D];第四军医大学;2005年

5 闫晓华;外周血sTRAIL水平及TRAIL基因多态性与中国汉族人脂肪肝的相关性研究[D];山东大学;2008年

，

本文编号：1305750