山羊FGF10基因的克隆及其表达分析

发布时间：2017-12-23 15:03

本文关键词：山羊FGF10基因的克隆及其表达分析　出处：《农业生物技术学报》2016年11期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：成纤维细胞生长因子10(fibroblast growth factor 10,FGF10)是一种极其重要的生长因子,能促进小鼠(Mus musculus)和人(Homo sapiens)前体脂肪细胞的分化。为了获得山羊(Capra hircus)FGF10基因序列,研究其组织表达特性,确定其在肌内前体脂肪细胞分化过程中的表达模式,并分析FGF10 m RNA表达水平与肌内脂肪沉积的关系,本研究以简州大耳羊(C.hircus)为实验动物,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术克隆FGF10基因,采用II型胶原酶消化获得山羊原代肌内前体脂肪细胞,利用实时荧光定量PCR(q PCR)技术检测FGF10在成年山羊不同组织中的表达差异及其在肌内前体脂肪细胞分化过程中的表达水平,并将基因表达水平与肌内脂肪(intramuscular fat,IMF)含量进行关联分析。结果显示,克隆得到山羊FGF10基因(Gen Bank登录号:KT899958)序列1 252 bp,其中开放阅读框642 bp,编码213个氨基酸,与绵羊(Ovis aries)和牛(Bos taurus)的该基因同源性达100%,具有跨膜结构域和信号肽结构。FGF10在山羊肺脏中表达水平最高,显著高于其他组织(P0.05),在脾脏和脂肪中也存在较高水平的表达。FGF10 m RNA在成年羊背最长肌中表达量显著高于羔羊与育成羊(P0.05),相关性分析结果显示,FGF10 m RNA表达量与山羊背最长肌IMF含量呈显著正相关(P0.05)。FGF10 m RNA在肌内前体脂肪细胞中表达水平最低,在诱导分化后2 d达到最高。本研究结果为进一步阐明FGF10基因在山羊肌内脂肪沉积中的分子机制提供了理论依据。
【作者单位】：西南民族大学生命科学与技术学院;青藏高原动物遗传资源保护与利用四川省重点实验室;
【基金】：四川省“十三五”畜禽育种攻关项目(No.2016NZ0099-36) 四川省科技创新产业链示范工程重大项目(No.2014NZ0003) 西南民族大学研究生创新型科研项目(No.CX2016SZ077)
【分类号】：S827
【正文快照】： 羊肉因其具有高蛋白、低脂肪、低胆固醇以及鲜嫩多汁的特点在我国肉类产品生产和消费中占据着重要的地位(王兆丹等,2009)。但是,随着经济的发展和生活水平的提高,消费者对羊肉肉质的要求也逐步提高。肌内脂肪(intramuscular fat,IMF)是存在于肌外膜、肌束膜和肌内膜上的一种脂

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