BHC80对斑马鱼心血管和造血系发育影响的初步研究

  本文关键词：斑马鱼抗寒模型的构建及鱼类相关基因功能探讨，由笔耕文化传播整理发布。

《复旦大学》 2009年

BHC80对斑马鱼心血管和造血系发育影响的初步研究

侯嘉云  

【摘要】： BHC80是BHC复合物(BRAF-histone deacetylase complex)的一个组分,神经细胞和非神经细胞内都有表达,参与非神经细胞中神经特异性基因的转录抑制。BHC80结合H3K4me1/2去甲基后的产物H3K4me0,帮助维持LSD1与靶基因启动子的结合而阻止H3K4me0重新甲基化成H3K4me1/2,因而BHC80参与LSD1抑制基因转录。 BHC80的基因敲除导致哺乳动物出生后很快死亡,不能用于心血管系统的研究。同时原始造血特异的因子缺失使哺乳动物在出生前死亡,也不能对定向造血进行观察;而斑马鱼可以通过渗透作用提供氧气和营养,氧气供应的25%-40%由体表渗透,即使心血管和血液系统有严重的缺陷也可以存活较长时间。同时斑马鱼仔鱼通体透明,可用肉眼直接观测表型变化。斑马鱼基因组,尤其是编码基因与哺乳动物同源性高达75%,因此斑马鱼是研究心血管和胚胎造血早期发育的良好模式生物。我们利用斑马鱼具有的独特优势研究BHC80在心血管系统发育和胚胎造血中的作用。 本文第一部分:用生物信息学的方法证明BHC80在脊椎动物的进化过程中结构和功能较为保守。应用胚胎整体RNA原位杂交研究斑马鱼BHC80基因在早期胚胎发育过程中的表达谱。 本文第二部分:用吗啡啉修饰的反义寡核苷酸干扰BHC80 mRNA剪接,下调斑马鱼BHC80基因表达。用RT-PCR方法验证吗啡啉修饰的反义寡核苷酸干扰的有效性。 本文第三部分:BHC80基因表达下调的斑马鱼胚胎心脏出现多种异常的表型,包括心房心室大小异常、环化不完全、严重者心脏发育呈管状、心搏减弱等。用显微荧光造影检测血管的发育情况,BHC80基因表达下调的斑马鱼胚胎血管无明显缺陷。 本文第四部分:BHC80基因表达下调导致红细胞数量减少和PB1区红细胞堆积。BHC80基因表达下调使胚胎红系前体细胞增值增多并且分化延迟。因此可以认为BHC80是斑马鱼胚胎早期正常造血功能所必须。

【关键词】：
【学位授予单位】：复旦大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2009
【分类号】：Q46
【目录】：

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