黄瓜CsHIR1基因表达载体的构建及遗传转化

发布时间：2018-02-09 08:33

  本文关键词： 黄瓜 CsHIR 表达载体 遗传转化　出处：《西北农业学报》2017年02期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：为了优化黄瓜遗传转化体系以及研究CsHIR1基因在黄瓜中的功能特性,本试验利用In-fusion技术构建植物表达载体pCAMBIA35S-CsHIR1,经过限制性内切酶SalⅠ和BamHⅠ双酶切检测、质粒PCR检测和测序鉴定,结果表明,表达载体pCAMBIA35S-CsHIR1已构建成功并转入农杆菌GV3101中。以黄瓜抗病种质‘PI197088’和感病种质‘CCMC’的子叶节为外植体,通过优化的农杆菌介导法初步将CsHIR1基因转入黄瓜中,经PCR检测获得25株阳性植株,其中8株阳性植株自交得到种子T1代,T1代PCR检测阳性率为44.7%,实时荧光定量分析表明CsHIR1在T1代阳性株中的相对表达量稍高于对照植株,有1株与对照组的差异较显著,这为进一步研究CsHIR1在黄瓜中的功能奠定了基础。
[Abstract]:In order to optimize the genetic transformation system of cucumber and study the functional characteristics of CsHIR1 gene in cucumber, the plant expression vector pCAMBIA35S-CsHIR1 was constructed by In-fusion technique. The recombinant plasmid was identified by restriction endonuclease Sal 鈪，

本文编号：1497518