万寿菊类胡萝卜素裂解双加氧酶基因CCD1克隆与表达分析
发布时间:2018-02-23 20:13
本文关键词: 万寿菊 类胡萝卜素裂解双加氧酶基因 花色 基因表达 出处:《中国农业科学》2017年10期 论文类型:期刊论文
【摘要】:【目的】克隆万寿菊(Tagetes erecta L.‘Scarletade’)类胡萝卜素裂解双加氧酶基因CCD1(TeCCD1),分析其序列特征和表达特性,为阐明其在类胡萝卜素降解途径中生物学功能及进一步探讨万寿菊花色形成机理提供理论基础。【方法】依据万寿菊花蕾转录组数据,利用同源序列比对结果设计引物,结合RT-PCR技术克隆获得万寿菊CCD1 cDNA全长,分析其序列特征;利用Real-time PCR分析舌状花未开花蕾、半开花蕾、开放的头状花序和完全开放的头状花序4个不同发育时期的基因表达特性。【结果】克隆获得万寿菊CCD1(Gen Bank登录号:KX557488)的cDNA全长序列为1 746 bp,编码区长度1 626 bp,编码541个氨基酸。蛋白质分析表明TeCCD1为不稳定蛋白,不含信号肽,属RPE65超家族(登录号:PF03055),包含CCD家族保守结构域,主要定位于细胞质。万寿菊CCD1核酸序列与除虫菊CCD1同源性最高,为89%;氨基酸序列分析表明万寿菊CCD1与除虫菊CCD1同源性高达93%,与其他19个不同种属的CCD1同源性在75%—83%,说明TeCCD1是高度保守的基因;系统进化树分析显示TeCCD1的进化基本符合植物分类学的进化规律,并具有明显的种属特征,万寿菊与菊科同源基因亲缘关系最近。Real-time PCR分析表明TeCCD1在舌状花发育过程中均有表达,随舌状花的开放逐渐升高,S4期达到最大值。【结论】克隆获得万寿菊舌状花的CCD1,是典型的CCD家族成员,为高度保守的基因,主要定位于细胞质,万寿菊舌状花颜色变浅可能与CCD1表达量增加导致类胡萝卜素降解有关。
[Abstract]:In this paper , the cDNA full - length cDNA sequence of Tagetes erecta L . ' Scarletade ' ) was cloned and its sequence identity and expression were analyzed . Conclusion The CCD 1 , a typical CCD family member , is a typical CCD family member . It is a highly conserved gene . It is mainly localized in the cytoplasm , and the color of the tongue - like flower of Tagetes erecta may be related to the increase of the expression level of the CCD 1 , which results in the degradation of carotenoid .
【作者单位】: 上海交通大学农业与生物学院;农业部都市农业(南方)重点实验室;华中农业大学园艺林学学院/园艺植物生物学教育部重点实验室;
【基金】:教育部“创新团队发展计划”(IRT13065)
【分类号】:Q943.2;S681.9
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,本文编号:1527454
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