慈竹CBF1全长基因的克隆及其分析

发布时间：2018-02-25 09:23

本文关键词： 慈竹 CBF 基因克隆基因表达　出处：《竹子学报》2017年02期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：分离和克隆慈竹CBF1基因,探明低温下转基因烟草诱导的表达情况,以慈竹叶片为材料,通过RT-PCR和RACE技术克隆慈竹CBF1基因的全长cDNA序列,并进行生物信息学分析;同时选用转基因烟草T2代株系为材料,进行半定量RT-PCR,分析NaCBF1基因在烟草中的表达情况。结果表明:克隆得到慈竹NaCBF1基因(Gen Bank登陆号为JN896707),全长序列为1 051 bp,其中包括5'-UTR 54 bp,3'-UTR 334 bp,编码区663 bp,编码223个氨基酸,分子量为23.48 kDa,等电点为5.27,为不稳定疏水性蛋白。氨基酸序列比对分析表明,NaCBF1与CtCBF1、HvCBF1和TaCBF1一致性分别为93%、86%和85%,且NaCBF1与CtCBF1、PeDREB1聚为一类。不同低温胁迫下,转NaCBF1基因烟草植株均能正常转录,表明具有耐寒性。NaCBF1参与植物对低温胁迫的调控,对其环境胁迫响应还有待探讨,为进一步分析其在不同信号途径相互作用中的功能和调控机制提供有力证据。
[Abstract]:The CBF1 gene was isolated and cloned, and the expression induced by transgenic tobacco at low temperature was confirmed. The full-length cDNA sequence of the CBF1 gene was cloned by RT-PCR and RACE techniques, and the bioinformatics analysis was carried out. At the same time, transgenic tobacco line T2 was selected as the material, Semi-quantitative RT-PCR was used to analyze the expression of NaCBF1 gene in tobacco. The results showed that the NaCBF1 gene Genin Bank was cloned as JN896707, with a full-length sequence of 1 051 BP, including 5- UTR 54 bp3 + -UTR 334 BP, encoding 663 BP, encoding 223 amino acids. The molecular weight was 23.48 kDa, the isoelectric point was 5.27, and the amino acid sequence alignment analysis showed that the consistency of NaCBF1 with CtCBF1HvCBF1 and TaCBF1 were 93% and 85%, respectively, and NaCBF1 and CtCBF1 PeDREB1 were clustered into one group under different low temperature stress. The transgenic tobacco plants with NaCBF1 gene can transcribe normally, indicating that the plants with cold tolerance. NaCBF1 is involved in the regulation of low temperature stress, and the response to environmental stress remains to be explored. It provides evidence for further analysis of its function and regulation mechanism in the interaction of different signal pathways.
【作者单位】：凯里学院环境与生命科学学院;四川农业大学风景园林学院;
【基金】：贵州省科技厅博士基金项目(黔科合J字[2014]2153号) 凯里学院博士启动基金项目(BS201332)
【分类号】：Q943.2;S795.5

【参考文献】

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