RNA干扰技术抑制洋桔梗ACC合酶基因的表达

发布时间：2018-03-08 15:13

  本文选题：洋桔梗　切入点：ACC合酶　出处：《江苏农业学报》2017年02期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：为了延长洋桔梗的花期,本研究通过农杆菌介导法,以ACC合酶(ACS)基因干扰表达载体,对Double Mariachi Pink洋桔梗(Eustoma grandiflorum)的叶片外植体进行了转化。经过再生芽的筛选增殖培养,在含有卡那霉素Km(15 mg/L)再生根筛选培养基中得到了46株抗性苗,其中11株经GFP基因PCR鉴定为阳性。经进一步的GFP基因RT-PCR鉴定,3株表达为阳性,并且其中2株经GFP荧光检测呈阳性。提取荧光阳性植株RNA,逆转录后,进行了ACS荧光定量PCR。结果表明,与未转基因对照植株相比,转基因植株ACS的相对表达量平均下降了63.17%。花期统计结果表明,ACS干扰表达载体转化的洋桔梗植株花期比未转基因植株对照延长了17 d。
[Abstract]:In order to prolong the flowering period of Platycodon grandiflorum, the leaf explants of Double Mariachi Pink Eustoma grandiflorum were transformed by Agrobacterium tumefaciens mediated by ACC synthase gene interference vector. 46 resistant seedlings were obtained in the culture medium containing kanamycin Km(15 mg / L, of which 11 were identified as positive by GFP gene PCR and 3 by GFP gene RT-PCR. Two of them were positive by GFP fluorescence detection. ACS fluorescence quantitative PCR was carried out by reverse transcription. The results showed that, compared with the non-transgenic control plants, two of them were compared with those of non-transgenic control plants. The relative expression of ACS in transgenic plants decreased by 63.17 on average, and the florescence statistics showed that the flowering period of Platycodon grandiflorum transformed by interference expression vector was 17 days longer than that of the control.
【作者单位】： 南京师范大学生命科学学院/江苏省生物多样性与生物技术重点实验室;
【基金】：江苏省自然科学基金重点项目(BK2001206)
【分类号】：S682.19

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 台;洋桔梗的栽培管理[J];北京农业;2004年10期

2 王丽勉;;盆栽洋桔梗的生产[J];中国花卉园艺;2006年20期

3 乔学义;赵群;;洋桔梗的栽培管理[J];中国花卉园艺;2007年02期

4 林方喜;李章汀;李赓;;台湾洋桔梗生产[J];台湾农业探索;2008年03期

5 李章汀;林方喜;张燕青;;台湾洋桔梗的育种概况与启示[J];台湾农业探索;2009年06期

6 佳茜;;荷兰为洋桔梗生产寻找最佳照明方案[J];中国花卉园艺;2013年22期

7 罗永刚;;鲜切花洋桔梗冬季管理措施[J];致富天地;2013年01期

8 李永红;切花洋桔梗育苗三法[J];中国花卉园艺;2003年01期

9 李群,刘光勇,王丽;激素对洋桔梗植株再生的影响及生根培养的研究[J];广西植物;2004年01期

10 张晓玲,徐义流;洋桔梗切花栽培技术[J];安徽农业科学;2004年02期

相关会议论文 前2条

1 傅玉兰;谷凤;杨海燕;戴英俊;黄新;;洋桔梗组培快繁技术研究[A];第二届全国植物组织培养、脱毒快繁及工厂化生产学术研讨会论文集[C];2004年

2 王琴;张春燕;胡惠蓉;;洋桔梗EgFT基因的载体构建和表达分析[A];中国观赏园艺研究进展（2013）[C];2013年

相关重要报纸文章 前7条

1 本报实习记者 董萌;从细节入手精心培育洋桔梗[N];中国花卉报;2012年

2 本报记者 黄正秉;洋桔梗遭遇育种育苗难题[N];中国花卉报;2012年

3 沈敏东;洋桔梗的栽培[N];中国花卉报;2003年

4 浙江虹越花卉有限公司 黄林芳 王飞君;洋桔梗‘阿林娜’系列栽培指南[N];中国花卉报;2008年

5 本报特约记者 陆继亮;洋桔梗生产田间管理是关键[N];中国花卉报;2010年

6 本报特约记者 陆继亮;技术田间出 创新增效益[N];中国花卉报;2006年

7 昆明缤纷园艺有限公司项目经理 黄仲恩;洋桔梗育苗技术要点[N];中国花卉报;2010年

相关博士学位论文 前1条

1 杨小玲;SeNHX1耐盐分子机制与耐盐洋桔梗培育[D];天津大学;2010年

相关硕士学位论文 前10条

1 张春燕;洋桔梗EgFT基因遗传转化的初步研究[D];华中农业大学;2013年

2 燕一波;洋桔梗切花衰老过程中的生理生化分析[D];福建农林大学;2007年

3 马洪英;洋桔梗天津地区引种及栽培技术研究[D];天津大学;2011年

4 何毅敏;海藻糖基因表达载体构建及转化洋桔梗研究[D];昆明理工大学;2009年

5 杨燕燕;洋桔梗高频再生系统的建立及几丁质酶基因的转化[D];南京师范大学;2007年

6 乔宁宁;烟草β-1，，3-葡聚糖酶基因转化洋桔梗的筛选、检测及抗灰霉病鉴定[D];南京师范大学;2013年

7 马源;外源开花素基因FT对洋桔梗的转化及育种研究[D];天津大学;2008年

8 杨海兰;AtchyB基因表达对转基因洋桔梗抗氧化性的影响[D];天津大学;2013年

9 周雨隆;as和chr基因表达载体构建及转化洋桔梗研究[D];昆明理工大学;2009年

10 陈红梅;skti和p-lec表达载体构建及转化洋桔梗研究[D];昆明理工大学;2009年

本文编号：1584416