核盘菌液滴凝集素SSL-6基因过表达质粒构建与油菜转化

发布时间：2018-03-11 12:33

  本文选题：核盘菌　切入点：分泌液滴　出处：《分子植物育种》2017年01期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：菌核病是由腐生型真菌核盘菌寄生引起的一种世界范围性严重病害,是我国油菜的主要病害之一,严重影响油菜的品质和产量。目前没有找到针对核盘菌的有效的免疫资源,因此通过不同的途径来开展抗菌核病抗性资源筛选研究具有非常重要的现实意义。本研究本着"以毒攻毒"的思路,将核盘菌自身可能参与致病的分泌型凝集素蛋白SSL-6基因转入甘蓝型油菜中,以期获得具有抗菌核病的油菜种质资源。通过基因克隆、过表达载体构建和借助根癌农杆菌介导的油菜遗传转化,将SSL-6基因转到甘蓝型油菜"中双6号"基因组中;经过潮霉素抗性筛选与PCR鉴定,成功获得了75株转基因油菜;进一步RT-PCR检测,筛选到5株SSL-6基因高表达的转基因植株。这些转基因油菜植株为下一步菌核病的抗性研究提供了重要的基础材料。
[Abstract]:Sclerotinia sclerotiorum is a worldwide serious disease caused by sclerotia sclerotiorum. It is one of the major diseases of rapeseed in China, which seriously affects the quality and yield of rapeseed. At present, no effective immune resources have been found for Sclerotinia sclerotiorum. Therefore, it is of great practical significance to study the screening of resistant resources to Sclerotinia sclerotiorum through different ways. The secretory lectin protein SSL-6 gene of Sclerotinia sclerotiorum was transferred into Brassica napus in order to obtain the germplasm resources with resistance to Sclerotinia sclerotiorum (Sclerotinia sclerotiorum). Overexpression vector was constructed and transformed into "Zhongshuang 6" genome of Brassica napus by Agrobacterium tumefaciens-mediated genetic transformation, and 75 transgenic rapeseed were successfully obtained by hygromycin resistance screening and PCR identification. Five transgenic plants with high expression of SSL-6 gene were screened by further RT-PCR detection. These transgenic plants provide important basic materials for the further study on the resistance of sclerotia sclerotiorum to Sclerotinia sclerotiorum.
【作者单位】： 湖南农业大学农学院;湖南农业大学生命科学与技术学院;
【基金】：国家支撑计划项目(2013BAD01B03-10)资助
【分类号】：S435.654;Q943.2

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