转录因子Ets差异基因5在血管平滑肌细胞表型转化中的作用

发布时间：2018-03-13 07:02

  本文选题：Ets差异基因　切入点：血管平滑肌细胞　出处：《第二军医大学学报》2017年03期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：目的探讨转录因子Ets差异基因5(ETV5)在血管平滑肌细胞(VSMC)表型转化中的作用。方法分别采用ETV5过表达腺病毒载体(Ad-ETV5组)和绿色荧光蛋白(GFP)过表达腺病毒载体(Ad-GFP组)转染VSMC。人ETV5特异性小干扰RNA[血小板源性生长因子(PDGF)-BB+siRNAETV5组]及其随机阴性序列(PDGF-BB+siRNAscramble组)分别转染VSMC后采用PDGF-BB诱导VSMC表型转化。分别采用实时定量PCR(qPCR)和蛋白质印迹法检测各组细胞中VSMC表型标记物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和肌球蛋白重链11(MYH11)mRNA和蛋白的表达水平。分别采用平板划痕实验和CCK-8试剂盒检测各组VSMC的迁移和增殖活性。结果与Ad-GFP组相比,Ad-ETV5组VSMC中α-SMA和MYH11mRNA和蛋白的表达均降低(P0.05),迁移和增殖活性均升高(P0.05)。与PDGF-BB+siRNAscramble组相比,PDGF-BB+siRNAETV5组VSMC中α-SMA和MYH11mRNA和蛋白的表达均升高(P0.05),而迁移和增殖活性降低(P0.05)。结论 ETV5参与了VSMC的表型转化。
[Abstract]:Objective to investigate the role of transcriptional factor Ets differential gene 5 (ETV5) in phenotypic transformation of vascular smooth muscle cells (VSMCs). Methods ETV5 overexpression adenovirus vector (Ad-ETV5 group) and green fluorescent protein (GFP) overexpression adenovirus vector (Ad-GFP group) were used respectively. VSMC.Human ETV5 specific small interfering RNA [platelet-derived growth factor-PDGF-BB siRNAETV5 group] and its random negative sequence PDGF-BB siRNAscramble were transfected into VSMC and PDGF-BB induced VSMC phenotypic transformation. Real-time quantitative PCRqPCR and Western blotting were used to detect VSMC phenotype. The expression levels of 伪 -SMAand myosin heavy chain 11MYH11C mRNA and protein in VSMC phenotypic markers were measured. The migration and proliferation activity of VSMC in each group were detected by plate scratch test and CCK-8 kit, respectively. The expression of 伪 -SMA, MYH11mRNA and protein in VSMC of Ad-GFP group was lower than that of Ad-ETV5 group, and the activity of migration and proliferation was higher than that of PDGF-BB siRNAscramble group. Compared with PDGF-BB siRNAscramble group, the expression of 伪 -SMA, MYH11mRNA and protein in VSMC of PDGF-BB siRNAETV5 group was higher than that of PDGF-BB siRNAscramble group, while the expression of 伪 -SMA, MYH11mRNA and protein in VSMC of PDGF-BB siRNAscramble group was lower than that of PDGF-BB siRNAscramble group. ETV5 is involved in the phenotypic transformation of VSMC.
【作者单位】： 解放军117医院心血管治疗中心;
【分类号】：R54

【参考文献】

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【共引文献】

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本文编号：1605289