黑曲霉内切菊粉酶基因在毕赤酵母中的表达及应用研究

发布时间：2018-03-14 11:36

  本文选题：内切菊粉酶　切入点：毕赤酵母　出处：《食品工业科技》2016年08期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：利用PCR方法从黑曲霉(Aspergillus niger)基因组DNA中扩增内切菊粉酶(endo I)全长基因(1551 bp),经序列分析后将其连接到表达载体p PIC9K上,得到重组表达载体p PIC9K-endo I。重组质粒经Sac I线性化并电转化到毕赤酵母GS115,阳性转化子进行发酵产酶后考察其酶学性质。酶学性质研究表明,重组酶的最适p H和最适温度分别为5和60℃,重组酶在55℃下保温9 h后,重组菊粉内切酶仍残余83.2%的活性,表现出极高的热稳定性,Cu~(2+)、Ag~+对重组酶有明显的抑制作用。对内切菊粉酶水解菊粉的过程研究表明,重组内切菊粉酶能在8 h内将4%(w/v)菊粉水解为3~6个聚合度的低聚果糖,水解11 h后,低聚果糖得率达到63.5%,本研究为进一步开发以菊粉为原料生产低聚果糖的应用奠定了基础。
[Abstract]:The full-length inulinase I gene was amplified from Aspergillus Niger genomic DNA by PCR method, and was sequenced and ligated to the expression vector p PIC9K. The recombinant expression vector p PIC9K-endo Iwas obtained. The recombinant plasmid was linearized by Sac I and transformed into Pichia pastoris GS115. The optimum pH and temperature of the recombinant enzyme were 5 and 60 鈩，

本文编号：1611079