雌激素对去卵巢大鼠骨组织自噬相关基因表达的影响

发布时间：2018-03-21 07:48

  本文选题：雌激素　切入点：骨质疏松　出处：《福建医科大学》2016年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的:1、观察雌激素对去卵巢大鼠骨密度的影响;2、观察雌激素对去卵巢大鼠胫骨Atg5、Atg7、Ulk1和p62 m RNA表达的影响,探究雌激素是否改变大鼠自噬水平从而影响大鼠骨量。方法:将27只6月龄,体重约250±20g的SD(Sprague-Dawley)雌性大鼠随机分为去卵巢组18只及假手术组(Sham)9只,去卵巢组再随机平均分为单纯去卵巢组(OVX)和雌激素干预组(E2)。雌激素组(E2)每周用雌二醇0.1mg/kg肌肉注射;去卵巢组(OVX)与假手术组(Sham)每周等量生理盐水肌肉注射。干预24周。每组随机选取三只大鼠于干预前、干预后采用双能X线测量骨密度,同时于干预后取左侧胫骨骨组织制作HE染色病理切片,于光学显微镜下观察并用图像分析软件统计各组骨量;各组剩余6只大鼠,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR法)检测左侧胫骨骨组织Atg5、Atg7、Ulk1和p62 m RNA表达水平并进行统计比较。结果:1、干预前,各组大鼠体重及骨密度均无明显差异(P0.05)。干预六个月后,各组大鼠的体重均明显增加,OVX组体重升高更显著(P0.01),E2组大鼠与Sham组大鼠体重无明显差异(P0.05)。2、干预前,各组大鼠全身BMD无明显差异(P0.05)。干预六个月后,OVX组大鼠全身BMD显著低于Sham组、E2组大鼠(P0.05);而E2组与Sham组大鼠全身BMD差异无统计学意义(P0.05)。而在显微镜下观察骨组织HE染色病理切片发现Sham组及E2组骨小梁致密程度明显优于OVX组,Sham组与E2组差异不明显。图像分析各组骨小梁面积占骨髓腔比例提示,OVX组明显低于Sham组与E2组(P0.01)。3、实时荧光定量PCR结果显示:OVX组Atg5、Ulk1 m RNA表达量较Sham组、E2组显著升高(p0.01);Atg7 m RNA表达量较Sham组、E2组增高,且有统计学意义(P0.05);p62 m RNA表达量较Sham组降低,且有统计学意义(P0.05),而与E2组之间的差异无统计学意义(P0.05)。E2组与Sham组之间的对照,Atg5、Atg7、Ulk1与p62 m RNA的表达量差别均无统计学意义(P0.05)。结论:1、建立去卵巢大鼠骨质疏松模型成功;2、去卵巢大鼠体内自噬水平升高,雌激素逆转升高的自噬水平,改善骨质疏松。
[Abstract]:Objective to observe the effect of estrogen on bone mineral density (BMD) of ovariectomized rats and to observe the effect of estrogen on the expression of Ulk1 and p62m RNA in the tibia of ovariectomized rats. Methods: 27 SD Sprague-Dawley rats aged 6 months and weighing about 250 卤20g were randomly divided into ovariectomized group (n = 18) and sham-operated group (n = 9). The ovariectomized group was randomly divided into ovariectomized group (OVX) and estrogen intervention group (estradiol 0.1 mg / kg / week). Ovariectomized group (OVX) and sham-operated group (Sham) were injected intramuscularly with normal saline every week for 24 weeks. Three rats in each group were randomly selected before and after intervention, bone mineral density was measured by dual energy X-ray. At the same time, the left tibia bone tissue was taken from the left tibia bone to make HE staining pathological sections, observed under optical microscope and used image analysis software to count the bone mass of each group, the remaining 6 rats in each group, The expression levels of Atg5, Atg7 Ulk1 and p62 m RNA in the left tibial bone tissue were detected by real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction (RT-PCR). Results: before intervention, there was no significant difference in body weight and bone mineral density in each group. Six months after intervention, there was no significant difference in body weight and bone mineral density. There was no significant difference in body weight between the E2 group and the Sham group. There was no significant difference in total body BMD in each group (P 0.05). After six months of intervention, the total body BMD in OVX group was significantly lower than that in Sham group E 2 group (P 0.05), but there was no significant difference between E 2 group and Sham group in the whole body BMD. The HE staining of bone tissue was observed under microscope. Color pathological section showed that the density of trabecula in Sham group and E2 group was significantly better than that in OVX group Sham group and E2 group. Image analysis showed that the ratio of bone trabecular area to medullary cavity in each group was significantly lower than that in Sham group and E2 group, and real-time fluorescence was observed. The results of light quantitative PCR showed that the expression of Atg5 Ulk1 m RNA in OVX group was significantly higher than that in E2 group of Sham group, and the expression of RNA at 7 m in Sham group was significantly higher than that in Sham group. The expression of p62m RNA in P0.05 was significantly lower than that in Sham group. There was no significant difference between E2 group and E2 group. There was no significant difference between E2 group and Sham group. There was no significant difference in the expression of Atg5Ag 7 Ulk1 and p62 m RNA between E 2 group and E 2 group. Conclusion 1: 1, the ovariectomized rat model of osteoporosis was established successfully. The level of autophagy in ovariectomized rats was increased. Estrogen reverses elevated autophagy levels and improves osteoporosis.
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R580

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本文编号：1642918